1. 動物學實驗的實驗動物常見的處理方法
一、編號
實驗動物常需要標記以示區別。編號的方法很多,根據動物的種類數量和觀察時間長短等因素來選擇合適的標記方法。
(一)掛牌法:將號碼烙壓在圓形或方形金屬牌上(最好用鋁或不銹鋼的,它可長期使用不生銹),或將號碼按實驗分組編號烙在栓動物頸部的皮帶上,將此頸圈固定在動物頸部。該法適用於狗等大型動物。
(二)打號法:用刺數鉗(又稱耳號鉗)將號碼打在動物耳朵上。打號前用蘸有酒精的棉球擦凈耳朵,用耳號鉗刺上號碼,然後在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。該法適用於耳朵比較大的兔、狗等動物。
(三)針刺法:用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水,在耳部、前後肢以及尾部等處刺入皮下,在受刺部位留有一黑色標記。該法適用於大小鼠、豚鼠等。在實驗動物數量少的情況下,也可用於兔、狗等動物。
(四)化學葯品塗染動物被毛法:經常應用的塗染化學葯品有
塗染紅色:0.5%中性紅或品紅溶液
塗染黃色:3-5%苦味酸溶液
塗染黑色:煤焦油的酒精溶液
根據實驗分組編號的需要,可用一種化學葯品塗染實驗動物動物背部被毛就可以。如果實驗動物數量較多,則可以選擇兩種染料。該方法對於實驗周期短的實驗動物較合適,時間長了染料易退掉;對於哺乳期的子畜也不適合,因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。
(五)剪毛法:該法適用於大、中型動物,如狗、兔等。方法是用剪毛刀在動物一側或背部剪出號碼,此法編號清楚可靠,但只適於短期觀察。
(六)打孔或剪缺口法:可用打孔機在兔耳一定位置打一小孔來表示一定的號碼。如用剪子剪缺口,應在剪後用滑石粉捻一下,以免癒合後看不出來。該法可以編至1~ 9999號,此種方法常在飼養大量動物時作為終身號採用。
二、分組
(一)分組的原則:進行動物實驗時,經常需要將選擇好的實驗動物按研究的需要分成若干組。動物分組應按隨機分配的原則,使每隻動物都有同等機會被分配到各個實驗組與對照組中去,以避免各組之間的差別,影響實驗結果,特別是進行准確的統計檢驗,必須在隨機分組的基礎上進行。
每組動物數量應按實驗周期長短、實驗類型及統計學要求而定。如果是慢性實驗或需要定期處死動物進行檢驗的實驗,就要求選較多的動物,以補足動物自然死亡和認為處死所喪失的數量,確保實驗結束時有合乎統計學要求的動物數量存在。
(二)建立對照組:分組時應建立對照組。1.自身對照組:是指實驗數據而言。實驗動物本身在實驗處理前、後兩個階段的各項相關數據就分別是對照組和實驗組的實驗結果,此法可排除生物間的個體差異。2.平行對照組:有正對照組和負對照組兩種。給實驗組動物某種處理,而給正對照組用同樣方法進行處理,但並不採用實驗所要求的葯物或手段,負對照組則不給任何處理。3.具體分組時,應避免人為因素, 隨機把所有的動物進行編號,然後令其雙數為A組(實驗組),單數為B組(對照組)即可或反之。如果要分若干個組時,應該用隨機數字表示進行完全隨機分組。 一、實驗動物的除毛
在動物實驗中,被毛有時會影響實驗操作與觀察,因此必須除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脫毛等。
(一)剪毛法:剪毛法是將動物固定後,先用蘸有水的紗布把被毛浸濕,再用剪毛剪刀緊貼皮膚剪去被毛。不可用手提起被毛,以免剪破皮膚。剪下的毛應集中放在一容器內,防止到處飛揚。給狗、羊等動物采血或新生乳牛放血制備血清常用此法。
(二)拔毛法:拔毛法是用拇指和食指拔去被毛的方法。在兔耳緣靜脈注射或尾靜脈注射時常用此法。
(三)剃毛法:剃毛法是用剃毛刀剃去動物被毛的方法。如動物被毛較長,先要用剪刀將其剪短,再用刷子蘸溫肥皂水將剃毛部位浸透,然後再用剃毛刀除毛。本法適用於暴露外科手術區。
(四)脫毛法:脫毛法是用化學葯品脫去動物被毛的方法。首先將被毛剪短,然後用棉球蘸取脫毛劑,在所需部位塗一薄層,2~3分鍾後用溫水洗去脫落的被毛,用紗布擦乾,再塗一層油脂即可。
適用於狗等大動物的脫毛劑配方為:硫化鈉10g,生石灰15g,溶於100ml水中。
適用於兔、鼠等動物的脫毛劑的配方為:1. 硫化鈉3g,肥皂粉1g,澱粉7g,加適量水調成糊狀;2. 硫化鈉8g,澱粉7g,糖4g,甘油5g,硼砂1g,加水75ml;3. 硫化鈉8g溶於100ml水中。
二、實驗動物的給葯
在動物實驗中,為了觀察葯物對機體功能、代謝及形態引起的變化,常需要將葯物注入動物體內。給葯的途徑和方法多種多樣,可根據實驗目的、實驗動物種類和葯物劑型、劑量等情況確定。
(一)注射給葯法
1. 皮下注射注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚,右手持注射器將針頭刺入,固定後即可進行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或側下腹部;豚鼠在後大腿內側、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外側注射,拔針時,輕按針孔片刻,防葯液逸出。
2. 皮內注射此法用於觀察皮膚血管的通透性變化或觀察皮內反應。 如將一定量的放射性同位素溶液、顏料或致炎物質、葯物等注入皮內,觀察其消失速度和局部血液循環變化,作為皮膚血管通透性觀察指標之一。方法是:將動物注射部位的毛剪去,消毒後,用皮試針頭緊貼皮膚皮層刺入皮內,然後使針頭向上挑起並再稍刺入,即可注射葯液。注射後可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注射當給動物注射不溶於水而混懸於油或其他溶劑中的葯物時,常採用肌肉注射。肌肉注射一般選用肌肉發達、無大血管經過的部位,多選臀部。注射時針頭要垂直快速刺入肌肉,如無回血現象即可注射。給大、小鼠作肌肉注射時,選大腿外側肌肉進行注射。
4. 腹腔注射先將動物固定,腹部用酒精棉球擦試消毒,然後在左或右側腹部將針頭刺入皮下,沿皮下向前推進約0.5厘米,再使針頭與皮膚呈45 度角方向穿過腹肌刺入腹腔,此時有落空感,回抽無腸液、尿液後,緩緩推入葯液。此法大小鼠用的較多。
5. 靜脈注射是將葯液直接注射於靜脈管內,使其隨著血液分布全身,迅速奏效。但排泄較快,作用時間較短。
6. 淋巴囊注射蛙類常採用此法,其皮下有數個淋巴囊,注入葯物甚易吸收。腹部淋巴囊和頭部淋巴囊常作為蛙類給葯途徑。一般多選用腹部淋巴囊給葯。注射時將針頭從蛙大腿上端刺入,經大腿肌層入腹壁肌層,再進入腹壁皮下,即進入淋巴囊,然後注入葯液。
(二)經口給葯法
1. 口服法:把葯物放入飼料或溶於飲水中讓動物自動攝取。此法優點在於簡單方便,缺點是不能保證劑量准確。一般適用於對動物疾病的防治或某些葯物的毒性實驗,製造某些與食物有關的人類疾病動物模型。
2. 灌胃法:在急性實驗中,多採用灌胃法。此法劑量准確。灌胃法是用灌胃器將所應投給動物的葯灌到動物胃內。灌胃器由注射器和特殊的灌胃針構成。小鼠的灌胃針長約4~5cm,直徑為1mm,大鼠的灌胃針長約6~8cm,直徑約1.2mm。灌胃針的尖端焊有一小圓金屬球,金屬球為中空的。焊金屬球的目的是防止針頭刺入氣管或損傷消化道。針頭金屬球端彎曲成20°左右的角度,以適應口腔、食道的生理彎曲度走向。
(三)其它途徑給葯方法
1. 呼吸道給葯:呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等狀態的葯物或毒氣,均需要通過動物呼吸道給葯。如實驗時給動物乙醚作吸入麻醉、用鋸末煙霧製作慢性氣管炎動物模型等,特別在毒理學實驗中應用更為廣泛。
2. 皮膚給葯:為了鑒定葯物或毒物經皮膚的吸收作用、局部作用、 致敏作用和光感作用等,均需採用經皮膚給葯方法。如兔和豚鼠常採用背部一定面積的皮膚脫毛後,將一定的葯液塗在皮膚上,葯液經皮膚吸收。
3. 脊髓腔內給葯:此法主要用於錐管麻醉或抽取腦脊液。
4. 腦內給葯:此法常用於微生物學動物實驗,將病原體等接種於被檢動物腦內,然後觀察接種後的各種變化。
5. 直腸內給葯:此種方法常用於動物麻醉。兔直腸內給葯時,常採用灌腸的膠皮管或用14號導尿管代替。
6. 關節腔內給葯:此法常用於關節炎的動物模型復制。
2. 在做動物實驗時,怎麼做才能使動物不至於那麼痛苦的死去
實施實驗動物安樂死的方法
動物實驗結束後為了減輕動物的疼痛及痛苦此時從人道主義的觀點出發可以對這些動物實施安樂死實施安樂死時有一些特殊的要求需要考慮最重要的是安樂死的方法必須人道動物實驗中有時為了獲得動物組織器官進行研究。安樂死的方法應該對動物的組織器官的研究沒有影響。另外實施安樂死的方法還要可靠有效經濟容易實施對實驗人員必須安全。
常用的實施安樂死的方法為葯物化學法
是指用一種葯物或其他化合物處死動物。最常用的是使用過量的全身麻醉劑。使動物心跳停止。呼吸衰竭而死亡。戊巴比妥相對來說作用迅速給葯簡單價格低廉。是常用的實施安樂死選擇的葯物腹腔或靜脈注射過量的戊巴比妥(100~150mg/kg)即可巴比妥酸鹽可致血管擴張。引起器官淤血,可能影響組織學研究。用於安樂死的吸入麻醉劑有乙醚氟烷恩氟烷和異氟烷等。
CO2也常被用做安樂死的吸入劑。將動物放置含有100%CO2的環境中很多種動物就產生嚴重的呼吸困難而死亡。用這種方法處死動物時動物意識清醒能感受到痛苦不是理想的方法。
如果將動物放置在一定濕度C02和O2的比例為6:4的混合氣體環境中等動物逐漸喪失意識後將CO2濃度升至100%。在最少保持10min以確定動物死亡這時動物完全是在無意識狀態下死亡的死亡需30~60min。如果時間太長則不是首選的方法。CO2等吸入劑能誘發動物肺水腫可能影響其後研究中對動物組織器官的利用。
3. 動物實驗時麻醉過深導致死亡的機制有哪些
要看是什麼葯,吸入葯多是抑制中樞神經系統,循環系統,呼吸系統等,局麻葯過量先是葯物中毒反應,比如譫妄,抽搐等,不過無論是什麼葯最後都是呼吸循環衰竭而死,早期發現的話可以用拮抗劑。
4. 每天做實驗要殺很多小鼠很不忍心該怎樣克服這種心理
有一句話說的是一個好的外科醫生要有一雙鷹的眼睛,一雙女人的手和一顆獅子的心。在面對實驗動物的時候,不論心裡承受多麼巨大的壓力,只要銘記一點,你的心越硬,你的手就會越穩,既然實驗動物已經面臨了這個命運,所以你高效穩定的動作,才是它們犧牲前得到的最大的仁慈。
5. 如何根據眼部狀況評估動物的麻醉深度
括動物品系、使用途徑、體重、性別、動物健康狀況、溫度、其它同時使用的葯物在內的多種因素影響麻醉劑、止痛劑或鎮靜劑的使用劑量和有效時間。因此,在使用麻醉劑時必須時刻監測實驗動物的麻醉深度,以防止過度麻醉導致動物死亡或麻醉不足無法緩解動物的疼痛。足底反射、角膜反射、肌肉緊張和對皮膚夾捏的反應是檢測動物麻醉深度的
6. 麻醉量打大了會使動物直接停止呼吸嗎
看動物的體型,
根據動物的體型和年齡只要適量用葯就不會,
如果過量使用麻醉葯會致命。
7. 兔子麻醉過量會有什麼反應
兔子的耐受麻醉劑量是所有哺乳類動物中耐受劑量最低的一個動物。過麻最直接會導致兔心臟驟停或者心血管意外死亡。兔子麻醉不建議用乙醚麻醉。一是不安全。乙醚易燃,容易鳴爆造成危險。二是容易麻醉過度導致兔子心臟驟停死亡。大學就做過一件傻事。抽兔子動脈血 用乙醚麻醉。結果活活把兔子熏死。。。如果條件允許,建議用氯胺酮。烏拉坦 硫噴妥鈉或者戊巴比妥鈉或者速眠新(846合劑)出於實驗手術時間問題原因,讓麻醉時間更長,我給你推薦個長效麻醉劑 戊巴比妥鈉30mg/kg i.p.+水合氯醛300mg/kg i.v. 耳緣靜脈注射。或者烏拉坦 耳緣靜脈注射 再不就用速眠新(846合劑) 直接肌肉注射。過麻會導致兔子心跳驟停 呼吸抑制。控制好麻醉劑用量和用法。 還有,時刻聽心臟。如果心臟驟停馬上胸外按壓。可以活。短時麻醉用硫噴妥鈉靜推。硫噴妥鈉更應注意心臟。如果驟停也是拔針後迅速胸外按壓。也能活。
8. 關於動物手術麻醉問題,專家請指教
可以用戊巴比妥鈉麻醉,腹腔注射,貓大概是40mg/kg,狗的話可能要小些,具體數據可以網路查,不過我做過的兔子是45mg/kg,具體要參考實驗動物學數據。一次注射能夠麻醉3小時,深度麻醉(開腹操作)時間有1個小時。戊巴比妥鈉陣痛效果差點,但是足夠做開腹手術。本人不建議給動物陣痛葯。因為鎮痛葯強烈的心臟呼吸抑制左右提高了動物麻醉死亡率。
還有一種是水合氯醛,這個也是動物麻醉的常用葯品,不過效果沒戊巴比妥鈉好。具體怎麼用我也不大清楚。
希望這點東西對你有幫助