動物體外培養什麼條件

Ⅰ 動物細胞的培養

.動物細胞培養液的成分：體外細胞培養所需營養物質與體內基本相同，例如，需要糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等。將細胞所需的上述物質按其種類和所需數量嚴格配製而成的培養基，稱為合成培養基。由於動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內的環境，因此在使用合成培養基時，通常需加入血清、血漿等一些天然成分。
2.動物細胞培養液的特點：液體培養基、通常含動物血清。
3.動物細胞培養的條件：
①無菌、無毒的環境：對培養液和所有培養用具進行無菌處理，通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外應定期更換培養液，以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害。
②營養物質：無機物（無機鹽、微量元素等），有機物（糖、氨基酸、促生長因子等） 。
③血清和血漿 (提供細胞生長必須的營養成份) 。
④溫度和pH（36.5±0.5℃，7.2~7.4） 。
⑤氣體環境（95%的空氣+5%CO 2的混合氣體） 。
其中5%CO2氣體是為保持培養液的pH穩定 。
3.基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎，並用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個細胞，將處理後的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，成為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂增殖，出現接觸抑制。此時需要將出現接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外，原代培養就是從機體取出後立即進行的細胞、組織培養。當細胞從動植物中生長遷移出來，形成生長暈並增大以後，科學家接著進行傳代培養，即將原代培養細胞分成若干份，接種到若干份培養基中，使其繼續生長、增殖。通過一定的選擇或純化方法，從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質的細胞稱為細胞株。當培養超過50代時，大多數的細胞已經衰老死亡，但仍有部分細胞發生了遺傳物質的改變出現了無限傳代的特性，即癌變。此時的細胞被稱為細胞系。 培養基添加胰島素可促進細胞對葡萄糖的攝取。
與植物細胞的區別
1.培養基不同：植物細胞（固體培養基），動物細胞（液體培養基） 。
2.培養基的成分不同：動物細胞培養必須利用動物血清，植物組織培養則不需要。
3.產物不同：植物組織培養最後一般得到新的植物個體，而動物細胞培養因為動物體細胞一般不能表達其全能性，因此得到的是同一種的細胞。
4.原理不同：植物組織培養的原理為植物細胞的全能性，動物細胞培養的原理為細胞的增殖。
5.過程不同：植物組織培養的過程為脫分化和再分化，動物細胞培養的過程為原代培養和傳代培養。

Ⅱ 動物細胞培養需要在什麼條件的培養箱中培養

一、培養細胞生長的條件1、細胞的營養需要2、細胞的生存環境 溫度: 37 ℃ O2 CO2: 5% CO2 +H2O ← →H2CO3 ← →H+ + HCO3- pH: 7.2-7.4 滲透壓3、無污染4、無毒二、CO2培養箱及使用注意事項 <>1、 CO2培養箱設定的條件為37 ℃，5％ CO2 。2、使用CO2培養箱培養細胞時應注意的問題： ①用螺旋口瓶培養細胞時，需將瓶蓋微松，以保證通氣。 ②保持培養箱內空氣干凈。定期消毒（90 ℃ ，14 h)。 ③箱內加滅菌蒸餾水3000毫升蒸餾水於槽中以保持箱內濕度，避兔培養液蒸發。 細胞培養是要適宜的pH的，一般培養基中會加入Na2HCO3，根據培養箱中CO2濃度不同達到適宜的pH。如果只是培養成纖維類等比較好養的細胞，而且只是培養2~3天觀察生長，不做後續實驗的話，在普通培養箱中湊合一下也可以。但是長期培養的話，細胞狀態慢慢就不好了，如果是比較嬌貴的細胞，有可能根本養不了。

Ⅲ 動物細胞培養的原理

1、動物細胞培養原理是細胞增殖。

2、動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然後，放在適宜的培養基中，讓這些細胞生長和增殖。

細胞培養是指細胞在體外條件下的生長，動物細胞在單獨細胞培養的過程中不再形成個體。

Ⅳ 動物細胞培養需要哪些條件

一、細胞培養的條件和要求
1.所有與細胞接觸的設備、器材和溶液等，都必須保持絕對無菌，避免細胞外微生物的污染。

目前最可靠和最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。
如：玻璃製品、布類、金屬製品：6.8kg20min。
橡膠製品：3.6～4.5kg10min。
培養用液，如Hanks液，水解乳蛋白：3.6～ 4.5kg10min。
實驗中染菌物品和動物屍體等：6.8 kg20min。

試管、吸管等，則可採用乾熱滅菌；
一切不適於加熱滅菌的液體，如人工合成培養液、小牛血清、胰蛋白酶等溶液，可採用過濾法除菌。

細胞培養中常用的消毒劑濃度及其使用場合

2.必須有足夠的營養供應，而絕對不可有有害的物質，包括極微量的有害離子的摻入，為此必須注意器材的清洗和配液用水的質量。

細胞培養中對水的質量要求很高（見水處理）。

3.保證有適量的氧氣供應。

細胞代謝需要有空氣，否則細胞死亡。在用培養瓶進行靜止培養，或用轉瓶進行旋轉培養時，只要培養的液體量不超過總容量的30％，通過與液面的空氣交換，可以保證細胞有足夠的氧氣。當用罐子深層培養時，則必須通氣，一般採用含5％CO2的空氣，或根據需要將CO2、N2、O2和空氣以不同比例混合，過量氧對細胞的生長也不利。

4.需隨時清除細胞代謝中產生的有害產物。

細胞在代謝過程中會產生大量代謝廢物，如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等，這些產物對細胞的生存有害，必須及時清除。在小量培養時，當培養基中酚紅指示劑顯示黃色，表示已有相當量乳酸產生，要及時更換新鮮的培養基。在大量培養時，則需隨時測定葡萄糖和乳酸等含量，並調節灌流速度，使代謝產物保持在無害水平下。

5.有良好的適於其生存的外界環境，包括溫度、pH、滲透壓和離子濃度等。

不同的細胞對pH的要求不同，一般來說適於細胞生長的pH在6.8～7.4，過高或過低均不利於細胞生長。如上所述，細胞在代謝過程中會產生大量乳酸，使培養的pH下降。為了保持培養液的pH，常在培養液內加入各種緩沖系統，如Na2HPO4/Na2HPO4、NaHCO3/H2CO3（CO2）、Tricineglycine，以及加緩沖劑Hepes液（常用濃度為10～50mol/L）.

6.及時分種，保持合適的細胞密度（見細胞傳代）