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難溶葯物怎麼做動物實驗

發布時間:2023-05-29 10:35:49

㈠ 葯物幾乎不溶於水,做動物實驗,用什麼配葯

葯物幾乎不溶於水,做動物實驗,用什麼配葯
細胞毒性葯物在配葯過程中,若個人不加任何中圓防護,對人體還是有危害的。搏培銀細胞毒性葯物是指在生物學方面有危害性影響的葯物,包括生殖系統毒性、致基宴癌性、致畸性或損傷生育及低劑量時致一系列器官損害的毒性葯物,

㈡ 葯物的溶解度實驗怎麼做

GB/T 21845-2008 化學品 水溶解度試驗

㈢ 懇請高人解惑,如何確定你提取的葯物是否進入細胞,希望能詳細點,我想做一下動物實驗,謝謝!

動物實驗之前先做細胞試驗 細胞種類就選葯物可能或者主要作用的靶細胞
要檢測葯物有沒進入細胞,這跟你試驗的葯物有關了。
如果是化學合成類葯物,那就在合成的時候摻入同位素。細胞培養給葯一段時候後換液,檢測胞內放射性。
如果是大分子,比譽判如一些蛋白類葯物,可以在蛋白上連一些易於檢測的小分子,如地高辛之類的,然後再用試劑盒檢測。
當然,還可以通過檢測培養液中葯物濃度的下降幅度來間接檢測。冊頌
一定要做動物實驗的話么,也是可以的。以前看到過文獻,用同位素標記葯物,然後給葯。一段時間後根據動物體內放射性物質分布的區慶姿改域來判斷給葯後葯物的主要去向。

㈣ 動物血葯濃度變化曲線實驗方法

實驗二 動物體內磺胺葯濃度測定院系:理學院 專業:農葯學 學號:09310110020 姓名:王熠實驗二 動物體內磺胺葯濃度測定1、目的掌握磺胺類葯物在動物體血液和組織中濃度測定的方法――重氮化偶合比色測定法。2、原理不同時間采出的血樣中具有游離氨基的磺胺葯在酸性介質中與亞硝酸發生重氮化反應後,可與N-(1萘基)乙二胺產生偶合反應生成紫紅色偶氮染料,與經過同樣處理的磺胺葯標准液比較,用721分光光度計比色法測出組織中和不同時間的血液中磺胺嘧啶濃度。由於亞硝酸不穩定,在實驗中,用三氯醋酸與亞硝酸鈉反應制的得。 剩餘的過量亞硝酸影響測定,用氨基磺酸胺分解除去。3、實驗材料1、實驗動物兔子一隻。 2、設備與器械721分光光計、台秤、止血鉗、眼科鑷、手術刀、手術剪、保定架、注射器、燒杯、三角燒瓶、試管、漏斗、研缽、濾紙等。 3、葯物與試劑10%磺胺嘧啶鈉注射液15%三氯醋酸溶液 0.1%亞硝酸鈉溶液 0.5%氨基磺酸胺溶液0.1%二鹽酸N-(1萘基)-乙二胺溶液 磺胺嘧啶鈉貯存標准液 磺胺嘧啶鈉應用標准液4、試驗方法1、磺胺嘧啶鈉的血葯濃度的測定(1)取動物一隻,稱重,固定,剪毛,分離股動脈,近心端准備結扎線,遠心端剪斷股動脈,采空白血0.5mL,放入加有15.5 mL蒸餾水的燒瓶中,混勻,放置15min。(2)單劑量耳靜脈注射(100mg/kg)注射10%磺胺嘧啶鈉注射液2.3ml。 (3)采樣:靜注采樣時間:用葯後25min、30min 、1h、2h、3h時,股動脈采血0.5ml。 (4)各血樣0.5mL,加到15.5mL蒸餾水中,混勻,放置15min;再加15%三氯醋酸4mL,混勻,放置2min,過濾。
(5)取試管3支,各加入濾液5mL,為測定管取試管3支,加入空白對照液弊運5mL,為空白管 取試管3支,加入應用標准液5mL,為標准管(6)在以上各管中各加入0.1%亞硝酸鈉溶液0.5mL,混勻,放置3min (7)各加入0.5%氨基磺酸胺溶租謹液0.5mL,混勻,放置2min(8)各加入0.1%二鹽酸N-(1萘基)-乙二胺溶液2.5mL,充分混勻,放置10min (9)用721分光光度計在550nm波長處比色。以空白管校正光密度到0點,讀取標准管和測定管光密度,計算游離磺胺葯物含量。 (10)公式如下:測定管光密度游離磺胺葯含量= ――――――― × 0.00375mg/ml×40 標准管光密度2、組織磺胺葯濃度測定方法(1)采血後,將動物處死,取肌肉、肝臟、腎臟組織各2g。(2)將組織剪碎,在研缽租型梁中加蒸餾水5mL研磨,取上清液,殘渣用蒸餾水沖洗並回收於刻度試管,共得16mL。(3)加15%三氯醋酸4mL,混勻,靜置後過濾。 (4)取濾液,處理同血葯濃度測定。 (5)公式如下:測定管光密度游離磺胺葯含量= ――――――― × 0.00375mg/ml×10 標准管光密度五、實驗結果時間 編號 1 2 3 平均值 25min 0.160 0.160 0.160 0.160 表一: 血液中葯物吸光度測定結果 30min 1h 2h 3h 0.258 / 0.450 0.640 0.189 0.238 0.210 / / / 0.446 0.439 0.446 0.640 0.550 0.580 標准液 0.079 / 0.008 0.082 空白液 0 0 0 0 組織 編號 1 2 3 平均值 表二:組織中葯物吸光度的測定結果 肝 腎(稀釋4倍) 0.480 0.500 0.473 0.484 0.600 0.600 0.560 0.587 肌肉(稀釋8倍) 0.500 0.480 0.500 0.484 樣品 濃度 25min 0.293 表三:葯物濃度(mg/ml) 30min 1h 2h 3h 肝臟 0.384 / 0.816 1.170 0.886 腎臟 4.3 肌肉 7.09 六、結果討論與總結
1、股動脈的分離手術操作。由於平時操作機會較少,經驗不足,動手能力不夠,在分離股動脈時花費了較長的時間和精力。以致沒有及時取到10min的血樣,而是取得25min時的血樣。股動脈的分離與采血應該注意的事項:股動脈取血時注意動、靜脈的區分,鈍性分離;近心端穿線結扎時不要穿神經;肌肉、皮膚少穿一點;分離時注意神經的分離。采血後注意血管內血液弄乾凈,以免阻塞血管;如下次采血時血液不能流出,用手指輕輕按壓,以排出血管中的血凝塊。2、分光光度計的使用操作。由於應該使用一套比色杯來測定吸光度,而在實際操作中比色杯使用混亂,而且並沒有做到嚴格的潤洗,所以吸光度的測量存在較大的誤差。 分光光度計的使用應該注意的事項:(1)為了防止光電管疲勞。不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。(2)拿比色皿時,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。(3)清洗比色皿時,一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。每次做完實驗時,應立即洗凈比色皿。(4)測定有色溶液吸光度時,一定要用有色溶液洗比色皿內壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差。(5)在實際分析工作中,通常根據溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。 3、實驗過程中的失誤總結:(1)25min和30min時,由於股動脈分離不到位,採用了耳緣動脈采血,但是由於抽血時間較長,加血樣至蒸餾水中時,已有較多的血凝塊,從而前兩次測得的血葯濃度較小。而在一小時采血的時候,由於操縱不當,抽多了血液樣品,從而使得1h測得的數據偏大,以致於讀不出吸光度數據。(2)實驗操作中沒有嚴格要求,加樣時並沒有採用精準的移液槍加樣,而是採用移液管,所以葯品的體積肯定是使得數據不準確的一個重要因素。
(3)吸光度的測量存在較大的誤差。吸光度的數值應該控制在0.2~0.7,測量數值才會准確,而測得數據有一些超出了這個范圍,故存在誤差。 4、總結雖然實驗數據很不準確,比較讓人失望,但是這次試驗,我學會了股動脈的分離技術和動物體內磺胺葯濃度測定方法,並且對於實驗團隊和作有了進一步的認識和理解。雖然在實驗前做了預習,但是還是遇到了很多沒有預料的失誤,使我更加明白熟能生巧的意義,此外,必須多做實驗才能提高自己的實驗能力,還得在失敗中積累經驗,不斷總結,不斷反省,才能做好研究。感謝您的閱讀,祝您生活愉快。
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實驗二 動物體內磺胺葯濃度測定
實驗二 動物體內磺胺葯濃度測定
院系:理學院 專業:農葯學 學號:09310110020 姓名:王熠
實驗二 動物體內磺胺葯濃度測定
1、目的
掌握磺胺類葯物在動物體血液和組織中濃度測定的方法――重氮化偶合比色測定法。
2、原理
不同時間采出的血樣中具有游離氨基的磺胺葯在酸性介質中與亞硝酸發生重氮化反應後,可與N-(1萘基)乙二胺產生偶合反應生成紫紅色偶氮染料,與經過同樣處理的磺胺葯標准液比較,用721分光光度計比色法測出組織中和不同時間的血液中磺胺嘧啶濃度。
第 1 頁
由於亞硝酸不穩定,在實驗中,用三氯醋酸與亞硝酸鈉反應制的得。 剩餘的過量亞硝酸影響測定,用氨基磺酸胺分解除去。
3、實驗材料
1、實驗動物
兔子一隻。 2、設備與器械
721分光光計、台秤、止血鉗、眼科鑷、手術刀、手術剪、保定架、注射器、燒杯、三角燒瓶、試管、漏斗、研缽、濾紙等。 3、葯物與試劑
10%磺胺嘧啶鈉注射液
第 2 頁
15%三氯醋酸溶液 0.1%亞硝酸鈉溶液 0.5%氨基磺酸胺溶液
0.1%二鹽酸N-(1萘基)-乙二胺溶液 磺胺嘧啶鈉貯存標准液 磺胺嘧啶鈉應用標准液
4、試驗方法
1、磺胺嘧啶鈉的血葯濃度的測定
(1)取動物一隻,稱重,固定,剪毛,分離股動脈,近心端准備結扎線,遠心端
剪斷股動脈,采空白血0.5mL,放入加有15.5 mL蒸餾水的燒瓶中,混勻,放置15min。
第 3 頁
(2)單劑量耳靜脈注射(100mg/kg)注射10%磺胺嘧啶鈉注射液2.3ml。 (3)采樣:
靜注采樣時間:用葯後25min、30min 、1h、2h、3h時,股動脈采血0.5ml。 (4)各血樣0.5mL,加到15.5mL蒸餾水中,混勻,放置15min;再加15%三氯醋
酸4mL,混勻,放置2min,過濾。
(5)取試管3支,各加入濾液5mL,為測定管
取試管3支,加入空白對照液5mL,為空白管 取試管3支,加入應用標准液5mL,為標准管
第 4 頁
(6)在以上各管中各加入0.1%亞硝酸鈉溶液0.5mL,混勻,放置3min (7)各加入0.5%氨基磺酸胺溶液0.5mL,混勻,放置2min
(8)各加入0.1%二鹽酸N-(1萘基)-乙二胺溶液2.5mL,充分混勻,放置10min (9)用721分光光度計在550nm波長處比色。
以空白管校正光密度到0點,讀取標准管和測定管光密度,計算游離磺胺葯物含量。 (10)公式如下:
測定管光密度
第 5 頁
游離磺胺葯含量= ――――――― × 0.00375mg/ml×40 標准管光密度
2、組織磺胺葯濃度測定方法
(1)采血後,將動物處死,取肌肉、肝臟、腎臟組織各2g。
(2)將組織剪碎,在研缽中加蒸餾水5mL研磨,取上清液,殘渣用蒸餾水沖洗
並回收於刻度試管,共得16mL。
(3)加15%三氯醋酸4mL,混勻,靜置後過濾。 (4)取濾液,處理同血葯濃度測定。 (5)公式如下:
第 6 頁
測定管光密度
游離磺胺葯含量= ――――――― × 0.00375mg/ml×10 標准管光密度
五、實驗結果
時間 編號 1 2 3 平均值 25min 0.160 0.160 0.160 0.160 表一: 血液中葯物吸光度測定結果 30min 1h 2h 3h 0.258 / 0.450 0.640 0.189 0.238 0.210 / / / 0.446 0.439 0.446 0.640 0.550 0.580 標准液 0.079 / 0.008 0.082 空白液 0 0 0 0 組織 編號 1 2 3 平均值 表二:組織中葯物吸光度的測定結果 肝 腎(稀釋4倍) 0.480 0.500 0.473 0.484 0.600 0.600 0.560 0.587 肌肉(稀釋8倍) 0.500 0.480 0.500 0.484 樣品 濃度 25min 0.293 表三:葯物濃度(mg/ml) 30min 1h 2h 3h 肝臟 0.384 / 0.816 1.170 0.886 腎臟 4.3 肌肉 7.09 六、結果討論與總結
第 7 頁
1、股動脈的分離手術操作。
由於平時操作機會較少,經驗不足,動手能力不夠,在分離股動脈時花費了較長的時間和精力。以致沒有及時取到10min的血樣,而是取得25min時的血樣。
股動脈的分離與采血應該注意的事項:
股動脈取血時注意動、靜脈的區分,鈍性分離;近心端穿線結扎時不要穿神經;肌肉、皮膚少穿一點;分離時注意神經的分離。采血後注意血管內血液弄乾凈,以免阻塞血管;如下次采血時血液不能流出,用手指輕輕按壓,以排出血管中的血凝塊。
第 8 頁
2、分光光度計的使用操作。
由於應該使用一套比色杯來測定吸光度,而在實際操作中比色杯使用混亂,而且並沒有做到嚴格的潤洗,所以吸光度的測量存在較大的誤差。 分光光度計的使用應該注意的事項:
(1)為了防止光電管疲勞。不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。
(2)拿比色皿時,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
第 9 頁
(3)清洗比色皿時,一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。每次做完實驗時,應立即洗凈比色皿。
(4)測定有色溶液吸光度時,一定要用有色溶液洗比色皿內壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差。
(5)在實際分析工作中,通常根據溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。 3、實驗過程中的失誤總結:
第 10 頁
(1)25min和30min時,由於股動脈分離不到位,採用了耳緣動脈采血,但是由於抽血時間較長,加血樣至蒸餾水中時,已有較多的血凝塊,從而前兩次測得的血葯濃度較小。而在一小時采血的時候,由於操縱不當,抽多了血液樣品,從而使得1h測得的數據偏大,以致於讀不出吸光度數據。
(2)實驗操作中沒有嚴格要求,加樣時並沒有採用精準的移液槍加樣,而是採用移液管,所以葯品的體積肯定是使得數據不準確的一個重要因素。
(3)吸光度的測量存在較大的誤差。吸光度的數值應該控制在0.2~0.7,測量數值才會准確,而測得數據有一些超出了這個范圍,故存在誤差

㈤ 難溶性葯物吸收的主要限速過程是什麼

難溶性葯物吸收的主要限速過程是葯物的溶解速度。

對於易溶於水的葯物,可以製成各種固體或液體劑型,適合於各種給葯途徑。對於難溶性葯物,其溶出是吸收的限速過程,常常是影響生物利用度的最搜升主要因素。

在進行葯物的制劑設計時,應充分考慮理化性質的影響,其中最重要的是溶解度和穩定性。注射給葯途徑有皮下、肌內、血管內注射等。為了提高局部葯物濃度等尚可在脊髓腔、關節腔、腹腔、眼內、顱內等組織或腔道內注射。

葯物制劑的設計目的:

是為了滿足臨床治療和預防疾病的需要。適宜的劑型和制劑,對發揮葯效、減少葯物毒副作用、方便應用具有重要意義。不同的給葯途徑對制劑的要求也不同。口服給葯是指通過口腔攝入葯物,主要在胃腸道內吸收而轉運至體循環,以全身治療為目的的給葯方式。

新制劑應進行毒理學研究,包括急性、慢性毒性,有時還要進行致畸、致突變等實驗。局部用葯刺激性試驗。大輸液進行刺激性試驗、過敏試驗、溶血試驗及熱原檢查。

根據新制劑的適應證進行相應的葯理學評價。以證明該制劑有效,臨床前研究要求在動物體內進行,已上市的原料葯可用資料替代。

㈥ 脂溶性的葯物進行動物實驗用什麼溶劑好

總體來說,極性分子易溶於極性溶劑(如水);非極性分子易溶於非極性的溶劑(脂溶性).這就是常說的相似相溶. 至於你說有機合成中要用,補充幾點: 鹽類(如乙酸鈉,乙醇鈉之類的)溶於水,難溶於極性溶劑. 帶有羥基、羧基、氨基的一般易溶於水(氫鍵),極性較小的也溶於非極性溶劑(如乙醇);當然像硬脂酸,苯酚這類的燃念在水中的溶解度較小.這就要看羥基和拍段稿非羥基部分哪個對分子的影響更大了,一般來說,帶有苯環的或碳鏈較長時,非羥基部分的影響襲孝更大一些. 其實說到底,還是要看分子的極性程度,極性程度大的就易溶於極性溶劑中;反之,則更易溶於非極性溶劑中.

㈦ 幾乎不溶樣品三十分鍾後能溶解嗎

晚上好,這個和時間一般是沒有關系的……幾乎不溶解屬於微溶比如硫酸肼,完全不溶解是無極性或者無機沉澱物比如切片染色分散用的酞青藍和微晶纖維素。它們在水中溶解度不隨段胡著時間流逝而增大隻取決於溫度高低和物理膠束增溶,後者例外比如壓片的微晶纖維素在水中分散後再加入丙三醇和吐溫-20之後會隨著溶劑黏度升高而逐漸增溶現象請酌情參考。超聲震棒對固體難溶葯物顆粒在水中分散有明顯提升作用(振子功率越大,氣泡猛烈轟擊顆粒表面握晌攔的自由能越強力,如果能超聲均質至1um以下成為懸浮膠體對該謹睜葯物的溶解度將會有一個質的飛躍)。

㈧ 請教動物實驗中如何解決葯物水溶性問題

動物實驗中如何解決葯物水溶性問題
DMSO是一種細胞保護劑,它的碰褲作用機理是在細胞膜上打洞,使細胞內的水分子能滲透出來,從而防治冷凍細胞時,細胞內冰晶的歷吵指形成,而破壞細胞。所以在做細胞凍存時它是必不可少的,但DMSO又能損傷細胞使用它時需要有一定濃度,肢配一般採用的是終濃度10%就行了。最大濃度葯物的DMSO含量是0一般來說,培養基中濃度為小於0.5%就可以了,但據實驗觀察小於0.25%肯定沒有問題。相關要求不超過1%

㈨ 葯物溶解不了怎麼辦

葯物溶解不好,或者想陪唯增加葯物的溶解度,大概有以下辦法吧:

一、在葯物方面,可以製成鹽(針對弱酸弱鹼葯物)孫尺,增大溶解度。
二、可以用潛溶劑,兩種溶劑配合,使葯物的溶解度比在任何其中一種溶劑中的溶解度都大。
三、加助溶劑,指則亂高小分子物質,比如DMSO等。
四。加入增溶劑,比如表面活性劑吐溫80,加的時候應該先把葯物和吐溫80混合均勻,再一點一點加水溶解。

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