1. 動物細胞融合和植物體細胞雜交 所用的技術手段相同嗎
一般動物細胞融合用的是滅活的病毒(最常用的是仙台病毒哈~)來誘導原生質體融合的,滅活病毒是動物細胞融合特有的。植物細胞一般是用聚乙二醇PEG來誘導。
PEG誘導融合的特點:其優點是融合成本低,勿需特殊設備;融合子產生的異核率較高;融合過程不受物種限制。其缺點是融合過程繁瑣,PEG可能對細胞有毒害。?
PEG的作用機理: Kao等認為,由於PEG分子具有輕微的負極性,故可以與具有正極性基團的水、蛋白質和碳水化合物等形成H鍵,從而在在質膜之間形成分子橋,其結果是使細胞質膜發生粘連進而促使質膜的融合;另外,PEG能增加類脂膜的流動性,也使細胞的核、細胞器發生融合成為可能。
還有就是電融合法,電融合法是80年代出現的細胞融合技術,在直流電脈沖的誘導下,細胞膜表面的氧化還原電位發生改變,使異種細胞粘合並發生質膜瞬間破裂,進而質膜開始連接,直到閉和成完整的膜,形成融合體。