腺病毒動物實驗維持多久

A. 腺病毒可以直接注射動物嗎，如何操作

腺病毒對嚙齒類動物有致癌能力,或能轉化體外培養的...也可用病人鼻粘膜上皮脫落細胞直接染色檢測病毒抗原。...在作眼的檢查時應嚴格無菌操作,對所用設備充分滅菌...
(希望能幫助到你,請給好評,謝謝~)

B. 腺病毒的分類

分類及自上個世紀50年代發現並成功分離腺病毒以來，已陸續發現了100餘個血清型，其中人腺病毒有49種，分為A、B、C、D、E和F六個亞群（subgroup）。基因治療常用的人的2型及5型腺病毒在血清學分類上均屬C亞群，在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常強，滴度通常可以達到109pfu (plaque forming unit)/ml，其在單個細胞中的基因組拷貝數可達104（約占細胞總DNA的10%）。病毒顆粒比較穩定，通過CsCl梯度離心可以達到1010~1011pfu/ml，滿足動物實驗的要求。

C. 腺相關病毒質粒在體內多久開始表達

腺相關病毒（Adeno-associated Virus，AAV）屬於細小病毒科（parvoviridae），單鏈DNA病毒，經過改造的rAAV病毒工具已被廣泛的應用在動物水平的基因表達、基因操作和基因治療。AAV是迄今發現的一類結構最簡單的天然的復制缺陷型病毒，不能獨立復制，只有在輔助病毒如單純皰疹病毒存在時才能完成復制，生成子代AAV。

AAV病毒載體的優勢

1.表達時間長： 絕大多數重組rAAV 不會整合到基因組上，而是在宿主細胞中串聯形成附加體（episome）存在於細胞核中 ，細胞在細胞復制和分裂後會丟失附加體，並因此失去基因表達能力，rAAV在細胞分裂不旺盛的組織中可持續表達6個月以上;
2. 擴散性強： rAAV 的體積小，滴度高，因此具有遠高於腺病毒和慢病毒的擴散性，可以穿透血腦屏障，是理想的神經元和膠質細胞感染工具;
3. 特異性強： rAAV 有數十種常用的血清型，不同的血清型對不同的臟器有較高的識別及感染能力，是動物實驗首選;
4. 安全性高： 目前還沒有發現AAV 對人體致病，是美國FDA 批準的可以直接用於人體基因治療的最安全的病毒載體;
5. 免疫原性低： 當AAV 用局部大劑量感染肌肉、腦、眼等組織時，不易造成免疫反應;
6. 高穩定性： rAAV 病毒在4℃可以保存1 周，並且對氯仿等試劑具有抗性。

應用

1.介導目的基因 /RNAi 基因表達；
2.基因治療載體； 
3.神經環路研究中使用最廣泛的表達工具。

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D. 腺病毒有哪些

自上個世紀50年代發現並成功分離腺病毒以來，已陸續發現了100餘個血清型，其中人腺病毒有49種，分為A、B、C、D、E和F六個亞群（subgroup）。基因治療常用的人的2型及5型腺病毒在血清學分類上均屬C亞群，在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常強，滴度通常可以達到109pfu (plaque forming unit)/ml，其在單個細胞中的基因組拷貝數可達104（約占細胞總DNA的10%）。病毒顆粒比較穩定，通過CsCl梯度離心可以達到1010~1011pfu/ml，滿足動物實驗的要求。

E. rescue 基因轉染多長時間

2016-07-2920:57 來源：生物學霸 點擊次數：143在基礎醫學與生物學研究領域中，基因干預越來越重要，方法也越來越多。如何實現細胞和動物水平上的基因高表達或抑制，我們需要精準、高效的基因轉染方法。 目前動物體內基因轉染方式，廣義上來說有兩種： 1、基因工程小鼠 基因工程小鼠，是經典的動物體內基因干預模型，包括轉基因小鼠（TGmouse，transgeneticmouse），敲除小鼠（KOmouse，Konckoutmouse），敲入小鼠（KImouse,Knockinmouse）。 基因工程小鼠對生物醫葯研究發揮了巨大的作用，但也存在不少的限制因素： （1）從受精卵開始的基因干預，經過長時間發育的復雜代償，所表現出來的功能表型和實際的基因功能表型可能存在巨大的偏差。2015年8月份，nature雜志發表了DidierStainier研究小組發現受精卵敲除egfl7基因和成年後用RNA干擾阻斷egfl7的表達，模式生物所得到的表型完全不一樣。 （2）基因工程小鼠周期長，成本高。君憶否，動物房裡伺候老鼠，一把屎一把尿拉扯它，給它找對象，還得幫它養孩子。（哭死） 2、病毒載體介導的動物體內基因轉染 目前最主流的病毒載體工具有三種：腺病毒（adenovirus），慢病毒（lentivirus），腺相關病毒（AAV，adenovirusassociatedvirus）。 相比較基因工程小鼠的局限性，病毒載體優勢明顯： ●避免了發育代償的問題。 ●周期和維持成本要小得多。 ●病毒載體介導的基因干預可以在動物造模後進行，作為一個基因治療干預手段，與臨床更加接近，而不僅僅是完成基因功能研究。 圖：AAVinvivo實例——在體感染小鼠海馬組織對比 （1）慢病毒 慢病毒由於其本身的基因組整合特性，長時間表達，因而在細胞基因轉染中被廣泛用於建立基因穩轉細胞系。但在動物活體（invivo）水平，慢病毒相比腺病毒和腺相關病毒，劣勢明顯。 a.慢病毒滴度的限制：動物體內基因轉染對注射的活性病毒載體總量及注射體積都有極高要求，而注射體積往往是容易被忽略但實際上限制最大的因素，如小鼠腦室注射，注射的體積不能超過2μL。同樣的病毒注射總量，病毒滴度越高則注射的體積數越小，而比慢病毒由於滴度限制(108～109TU/mL）,單位體積所含的病毒活性病毒顆粒數相比腺病毒和AAV少得多，因此在動物體內（invivo）基因轉染的應用上，慢病毒的轉染效果不理想。 b.潛在致瘤性：慢病毒整合到宿主細胞的基因組中，形成穩定的持續表達。雖然普遍認為慢病毒是相對安全的，但這種隨機插入仍會有致瘤的潛在危險性。 （2）腺病毒 腺病毒載體在動物基因轉染實驗中，特點突出且鮮明： a.腺病毒能夠在注射干預的72小時即開始強烈表達，因而對於一些干預窗口特別短的急性體內基因轉染，腺病毒有著顯著的優勢。 b.腺病毒載體在體內的表達時程為2～4周，四周後表達基因表達衰減明顯；如需要延長表達時間，可在第一次注射兩周後進行第二次注射。 圖：不同劑量的腺病毒載體體內基因轉染的起效時間曲線J.KOLLSetc.Proc.Natl.Acad.Sci.USAVol.91,pp.215-219,January1994/ c.腺病毒有較高的免疫原性，通過系統性給葯比較容易激活免疫系統產生相應的抗體，影響體內基因轉染效果，因此腺病毒載體的是目的臟器的局部注射（肝臟例外）。最常見的腺病毒載體給葯方式為原位多點注射，比如骨骼肌，心肌，腫瘤組織等，一般選取3～5個注射點，每個點10µL左右的注射量。 （3）腺相關病毒（AAV）：動物體內基因轉染神器 腺相關病毒，即AAV，是最優秀最安全的動物體內基因轉染工具，相比較慢病毒等其他病毒載體，AAV有滴度高，免疫原性極低，表達時間長，無任何致病性及病理毒理作用，病毒顆粒小，擴散范圍廣，多血清型且有相對組織親和性等優點。 AAV有多種血清型，每種血清型的靶器官親和力各不相同，這一點決定了AAV與其他病毒載體相比，更具有選擇性。漢恆生物在原有的AAV血清型基礎上，開發出器官親和型。

F. 國自然標書中實驗用到腺病毒需要弄生物安全承諾書材料嗎

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實驗室生物安全承諾書

 

 

本人現在

XXXX

從事病原微生物檢測工作，對所從事檢

測工作的風險及危害已充分了解，為保障人民群眾身體健康

和生命安全，自覺維護社會穩定和社會安全，保證單位實驗

室不發生生物安全事件，現鄭重承諾：

 

1

、在從事檢驗檢測工作，特別是病原微生物檢測中，自覺

遵守《實驗室生物安全通用准則》

、

《傳染病防治法》

、

《病原

微生物實驗室生物安全管理條例》及相關的法律、法規、規

章、制度、技術標準的規定，嚴防責任事故的發生。

 

2

、認真學習中心體系文件的相關規定，遵守微生物實驗室

各項規章制度，嚴格檢驗檢測程序。

 

3

、積極參加生

G. 給大鼠注射腺病毒和慢病毒的區別

腺病毒優點：感染效率高，很多細胞都能達到近 99%；純化後的腺病毒可以直接進行動物活體注射

H. 腺病毒存在哪些動物的體內

腺病毒伴隨病毒屬（AAV）存在於哺乳動物和鳥類。AAV為缺損病毒,它需在宿主同時感染腺病毒並以其作為輔助病毒時才能復制。人的AAV有4型,人血清中普遍存在抗體,但與疾病的關系未定。此外，尚有禽、牛和狗的AAV。

I. 只需打1針的新冠疫苗，保護效果可以維持多久

只需打1針的新冠疫苗，保護效果可以維持至少六個月，所以現在還沒有接種新冠疫苗的人們，可以前往社區接種點，去進行新冠疫苗的接種工作了，畢竟如果要形成群體免疫，需要百分之七十以上的人有免疫力，才能達到一定的效果。接種的流程也非常的簡單，帶上身份證，直接去社區排隊接種就可以了。

但和兩針劑的疫苗接種人群一樣，有部分人最好是不要接種的，比如自身免疫疾病患者，慢性病的發病期間，還有一些凝血功能障礙患者，最好都不要接種新冠疫苗。此外，接種過一劑的人群，建議繼續接種滅活疫苗，不建議接種腺病毒疫苗加強，所以之前接種過一針的患者，就不要去接種了。

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