Ⅰ 對實驗動物采血的要求
1.小鼠和大鼠采血
(1)眼眶取血:將小鼠抓牢固定,用拇指和食指將眼部皮膚扒開,使眼球充分突出,眼窩內眥處為眼靜脈竇。將毛細管由此刺入,捻轉,輕輕外提,使血液充滿毛細管,采血後用一塊干紗布將眼合上數分鍾以止血。小鼠每次采血0.2~0.3mL,大鼠為0.5~1.0mL。
(2)剪尾采血:固定動物,將尾尖剪掉1~2mm(小鼠)或5~10mm(大鼠),然後自尾根部向尖部按摩,血即自尾尖流出。如需較多血也可先將尾浸於近50℃的熱水中,再剪去尾尖。采血後用膠布包紮尾尖進行壓迫止血。由於鼠血凝集快,需要全血應事先置抗凝劑於采血管中,如用血球懸液,應立即與生理鹽水混合。小鼠可取血0.1mL,大鼠可取0.3~0.5mL。
(3)斷頭取血:斷頭時,左手抓鼠,右手持剪刀於頸部迅速剪掉鼠頭,立即將鼠頸向下,血液即可流入已准備好的容器中
(4)腹主動脈采血:將動物麻醉,仰卧固定,從腹中線切開皮膚,暴露腹主動脈,用注射器抽取血液。
(5)股動(靜)脈采血:將動物麻醉固定後,進行一側腹股溝動、靜脈分離手術,血管下方分別穿一根絲線,左手提起血管,右手持注射器將針平行刺入血管內取血。
(6)心臟采血:動物麻醉後,仰卧固定於鼠板上,在左胸側第三、四肋間,用左手食指觸摸到心搏動處,右手持注射器垂直刺入心臟,抽取所需血量。小鼠取0.5~0.6mL,大鼠取0.8~1.2mL。
2.家兔采血
(1)耳中央動脈采血:將兔固定後,在兔耳中央有一條粗而鮮艷的中央動脈。左手固定兔耳,右手持注射器,在中央動脈末端向心方向刺入動脈,慢慢回抽針芯,動脈血立即進入針筒,一次可取血15 mL。
(2)耳緣靜脈采血:拔去耳緣部被毛,用燈泡照射加熱耳朵或以75%酒精塗擦局部,使靜脈擴張,再用石蠟油塗擦耳緣,防止血液凝固。耳受熱後用小血管夾夾緊耳根部,用粗號針頭逆靜脈迴流方向刺破靜脈或用刀片切開靜脈,血液可自動流出,一般可采血2~3mL。取血後棉球壓迫止血。
(3)心臟采血:操作同鼠類。兔一次最多采血25mL。
(4)股靜脈、頸靜脈采血:做股靜脈、頸靜脈分離術,然後采血。
Ⅱ 小鼠眼球取血技巧是什麼
小鼠摘除眼球采血及分離血清
一.器材
離心管,彎頭鑷子,離心機,移液器
二.步驟
1. 摘除眼球采血
(1)左手拇、食指抓取小鼠雙耳及頸後皮膚,小指固定尾部;
(2)中指將小鼠左側前肢輕壓在胸骨心臟部位,無名指按在腹部,捻動拇指,輕壓取血側眼部皮膚,使眼球充血突出;
(3)用彎頭鑷夾取眼球;
(4)根據需要捻動拇指與食指的方向,使血液從眼眶內以不同速度垂直流入離心管;
(5)同時用左手中指輕按小鼠心臟部位,以加快心臟泵血速度;
(6)當血液流盡時,用脫臼法處死小鼠。
2. 分離血清
(1)將離心管中的血置37℃溫箱或水浴1小時,也可室溫2小時;
(2)再置4℃冰箱內3~4小時或過夜;
(3)待血液凝固血塊收縮後,4000rpm離心10分鍾;
(4)取上清於干凈的離心管中,保存於-20℃,或加入防腐劑(0.01%硫柳汞或0.02%疊氮鈉),置4℃冰箱中保存備用。
三.注意:
1. 采血前,可給小鼠喂點水;
2. 摘眼球采血取血量能達0.8~1.2ml,但老年和疾病小鼠血量會降低;
3. 采血場所有充足的光線;室溫夏季保持在25~28℃,冬季,15~20℃為宜;
4. 防止血液浸入眼部周圍毛發,否則會造成污染和溶血;
5. 按壓心臟時,用力一定要適度,若用力過度,一是會造成動物采血中途死亡,使采血不完全,二是有可能引起溶血現象發生,影響實驗結果;
6. 采血用的器材和試管必須保持清潔乾燥;
7. 采血時要防止小鼠掙扎,否則會損失比較多的血樣;
8. 血液凝固後不宜在4℃放置過久,否則會溶血。
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Ⅲ 如何提取動物血球
獲得動物或者植物的單個細胞都是用酶解的方法。
獲得動物單個細胞的方法是:將動物幼嫩組織剪碎,然後用胰蛋白質酶處理,注意處理的時間,然後放在磷酸緩沖液中釋稀就能得到單個存在的動物細胞;
獲得植物單個細胞是將植物組織用果膠酶來處理,破壞植物間的胞間層,這樣就能獲得單個植物細胞,不過在生產及科研上,人們都是用纖維素酶和果膠酶來處理,獲得植物細胞的原生質體,然後再培養出細胞壁,從而得到單個植物細胞。
Ⅳ 生物 實驗動物非洲爪蟾如何取血要不殺死,可重復取血的方法
一般青蛙蟾蜍類少量采血都是腹壁靜脈采血,當然本人認為心臟采血也可以。但是活體不損傷采血有點困難,腹壁靜脈需要開腹腔。體外心臟采血的話對試驗手法要求比較高。
實驗器材和葯品
手術剪、鑷子、蛙板、探針、蛙釘1 mL注射器
實驗方法
1破壞蟾蜍腦和脊髓用探針從蛙枕骨大孔進
入,搗毀腦和脊髓,使骨骼肌鬆弛。
2固定蟾蜍將蟾蜍仰卧在蛙板上。用蛙釘固
定蛙體四肢,打開其胸腔和心包膜,暴露心臟。
3 采血 用注射器向心方向插入腹壁靜脈進行采血
Ⅳ 如何從大鼠眼眥中取血
1.大鼠麻醉問題;
我們將一浸過乙醚的棉球放在一小盤里,然後放在大鼠附近,再找個能罩住老鼠和盤子的大燒杯樣的東西,留個口罩住老鼠。等他醉了就可實施手術了。要是中途有醒,直接握住大鼠,將其鼻子塞進乙醚的瓶子里。觀察其麻醉狀態。不易過深,要不就死掉了。血都會變成黑色的,還粘稠。手段有些暴力,愛護動物的筒子們不要責怪。
2.取血工具:
我們用的是化學上用來測熔點的毛細管,有一定硬度。用肝素鈉注射液潤洗過的,掰成幾段,太短了手抓著不合適,太長了容易凝血。
3.手術手法:
在大鼠一側的眼內側眼球和內測眼瞼與頭平面呈60度左右的夾角,溫柔的用力,就可見血源了。不要捅的太深,捅到骨頭上,也不會出血。太淺老鼠受罪也取不出血來。要注意剪斷老鼠的胡須,以防干擾或溶血。我都是兩側眼後輪流取的。
還有一個技術關鍵就是血流變慢的時候,要用握大鼠的食指和拇指向腦後靜脈方向用力按壓。或者一開始的時候就要握緊。
剩下的就是收集血液,我們當時是兩個人幫忙完成的,一個人夠嗆。餘下的都不是什麼技術關鍵,不說了。
Ⅵ 動物實驗大鼠如何在死亡而不使得動物血液凝固的情況下取出血液
大部分實驗室都是斷頸後摘眼球取血的,
Ⅶ 如何從動物血液中分離血清
動物血清,
抗體酶是具有催化性質的抗體,它同時具備抗體和酶的特徵,可催化多種化學反應,如醯基轉移、酯水解、醯胺水解、重排反應、光誘導反應、氧化還原分應、金屬螯合反應等。用人工方法合成的抗體酶,可作為研究酶作用機理的有力工具,用於催化大量天然酶不能催化的立體專一性反應,更為開發具有高度選擇性的葯物指明了方向。
血清(blood
serum)
血液凝固後析出的液體.血液凝固的本質是血漿內的可溶性纖維蛋白原轉變為不溶解的纖維蛋白.纖維蛋白呈細絲狀,互相交織成網,網羅大量血細胞,形成凝膠狀的血塊.血凝後30分鍾~1小時,血凝塊中的血小板收縮蛋白收縮,使血塊回縮變硬,擠出清澈的液體,稱為血清.血清與血漿的區別,在於血清缺乏纖維蛋白原和參與血凝的凝血因子,但又增添了凝血過程中由血小板釋放的少量物質.
Ⅷ 動物血樣採集和血樣處理應該注意哪些問題
一、選擇好最佳采血時間
要選擇好采血時間與免疫日期的間隔。雞新城疫、禽流感、豬瘟、牛羊口蹄疫在免疫21天後采血,豬口蹄疫、高致性豬藍病在免疫後28天采血。因為疫苗接種後,動物體內產生穩定抗體水平,需要一定的時間和過程。
二、做好血樣採集前的准備工作
采樣前,准備好采樣所需的物品和防護用品,,如酒精棉、一次性注射器、記號筆、自封袋、標簽、膠皮手套、口罩、防護服、膠鞋、保溫箱等。
三、采樣前消毒,采樣後止血
采血前用75%酒精棉球局部消毒,以避免畜禽因采血而發生局部感染;雞的皮膚游離性比較大,采血後容易形成血腫,所以采血後,要搞好止血,把酒精棉球擠凈,壓迫采血部位,防止血流過多。
四、保證血清質量
獲得符合衛生要求和高質量的血清是采血的關鍵。采血方法同靜脈注射,只是靜脈注射的方向是針頭扎向近心端,而采血的方向則相反,針頭扎向遠心端,這樣采血順利。采血時應使血液沿采血管壁流入瓶中,不能讓血液直沖瓶底或滴入瓶底,容易引起溶血。
采完的血不要將采血管立放,這樣血清不易析出。要將采血管塞好後平放或斜放於容器中,血清就會自然析出,也可用離心機分離血清。血樣採好後,在來回的拿取的過程中, 要盡量避免振盪,防止溶血,影響監測結果。
五、保證采血樣品量
在基層采血主要是作抗體效價的監測,一份血清可能做幾種病的抗體效價監測,另外,有可能進行復查,所以血樣一定要足。一般牛、豬、雞血不少於3ml,血清量不少於1ml。
六、樣品要有代表性
在同群中要隨機抽樣,不要挑著抽。更不要專挑那些不健康、消瘦。如果挑著采樣,樣品代表不了整體,監測的效果沒有什麼意義。抽樣監測結果要代表群體,從抽樣的抗體合格率率反應整體的合格率,只有隨機才有代表性。
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七、采樣的標記要填寫規范
采血完成後,務必把采血的容器用標記筆記上標號或粘貼編號,同時填寫采樣單,並一一對應。
采樣單是對采樣品種群基本情況的簡要記錄,一定要認真填寫,包括畜主、飼養量、采樣量、采樣時間、免疫時間、疫苗種類、生產廠家、劑量都要一一填寫完整。
八、樣品的保存
血樣採好後,標記、整理、歸類。
Ⅸ 怎樣從動物身上提取血清(常規方法)
采血(不加抗凝劑),靜置直到血液凝固,然後放到37度半小時,4度過夜,效果還行
Ⅹ 小白鼠采血三種方法的優缺點,謝謝!
1.采血部位:眼眶采血
采血方法:將鼠固定在實驗台邊緣,左手抓緊鼠頸部皮膚固定頭部,並輕輕向下壓迫頸兩側,使眼球充血。用事先准備好的10號金屬針頭頂端(針尖斜面朝內)垂直插入內眥並向眼底方向轉動以便切開靜脈叢,血液便會連續不斷地滴入采血管。用此法大約可取3~5mL血液。取血完畢,立刻用脫脂棉壓迫止血。
優點:眼眶後靜脈叢采血法方法簡單,便於掌握。血流較快,采血量多,能在較短時間內採到3~5mL血。傷口較小,癒合較快。成功率高,死亡率低。
缺點:不能避免組織液的混入,對於血樣要求較高的研究應謹慎使用。另外,多次使用易引起大鼠的感染。對後續試驗結果存在一定影響。
2.摘眼采血:鼠可以眼球取血,需要多多練習。一般來說,可以三人配合取血。取血前不需麻醉,用眼科剪剪掉大鼠的胡須(胡須過長,血液滴下的時候容易沾在胡須上,既浪費,又造成溶血,故應剪掉)。
所需器械:眼科小剪、眼科彎鑷、止血鉗。
一人抓大鼠並用眼科彎鑷摘眼球,一人用止血鉗夾住大鼠的嘴部以固定大鼠頭部,另一個人拿試管接血。
大鼠在掙扎過程中,很容易導致血液丟失,因此固定頭部很重要,否則只有眼看著血液亂飛,卻不入試管。摘眼球也需要技巧,否則眼球摘下來了,而血液卻不流出來,應多多練習
優缺點不太清楚啊,只知道我一個學長摘眼球的時候被咬了一口,挺殘忍的
3.采血部位:心臟取血(其實這個一般用在家兔)
采血方法:將實驗動物做仰卧有助手固定,術者在其左前肢腋下處剪毛及消毒。在胸部心臟跳動最明顯處,用一寸長的12好針頭直刺心臟,感到以針頭跳動或有血液內流動時。即可抽血。一次可采血15-20ml
優點:抽血快,血液不易凝集,心區面積大, 進針准確性較高, 易一針見血, 且采血量能滿足大量試驗需要
缺點:心臟損傷較大,難以迅速癒合,不利於短期連續采血。
3『.采血部位:心臟采血(剪開皮膚)
采血方法:從胸部正中剪開皮膚2.0~2.5cm。暴露肋骨和肌肉。左手拇指和食指從胸廓兩則擠壓,以確定心臟的位置,此時可觸摸到心尖的搏動。然後拇指松開,右手持注射器(7號針頭),在胸骨左側(對操作者來說是右側),離胸骨0.5cm的第三肋和第四肋之間進針,並使針頭與肋骨側成90°左右的夾角。進針的深度為2cm左右(根據動物大小而定)。進針時用左手拇指和食指夾住心臟博動的位置,使之固定,進針要快。若針頭進入心室,由於壓力的原因血液會自動進入針管,抽起來很容易。若進針過深,就一邊回退一邊抽。若進針過淺,可感覺到針頭隨心臟的博動而搖動,這時可再進深一些。
優點:采血量大,樣本質量可靠。
缺點 :不能保證完全是動脈血,因進針的方向或操作問題亦可采出靜脈血。另外,應用本采血方法後,有部分鼠可造成死亡,因此不適合對動靜脈血有嚴格要求的實驗研究,亦不適用於試驗中間過程的采樣。