如何做好動物實驗

A. 影響動物實驗效果的動物實驗技術因素有哪些

一、動物選擇
選擇好適合研究需要的實驗動物是獲得正確實驗結果和實驗成功的重要環節。應按照不同實驗的要求選擇合適的動物。如作腫瘤的研究工作，就必須了解哪種動物是高癌種，哪種是低癌種，各種動物自發性腫瘤的發生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠，C3H/He系經產雌鼠有80～100%的自發性乳腺癌。AKR系8～9月齡小鼠有80～90%自發性血病。C57BL系、津白Ⅰ等小鼠是低癌品系小鼠。不同動物對同一因素的反應雖然往往是相似的，但也常常會遇到動物出現特殊反應的情況。如5歲以上的雌狗常自發性乳腺腫瘤，如果給雌狗孕激素，就更容易誘發乳腺腫瘤。雌激素還容易引起狗發生貧血，這在其它實驗動物是很少見的。怎樣選擇好實驗動物可參看實驗動物的選擇和應用一講。

二、實驗季節
生物體的許多功能隨著季節產生規律性的變動。目前已有大量資料表明，動物對化學物作用的反應也受到季節的影響。例如在春、夏、秋、冬分別給10隻大鼠注入一定量的巴比妥納，發現入睡時間以春季最短。秋季最長，而睡眠時間則相反，春季最長，秋季最短（見表11-19）。

表11-19大鼠對巴比妥納反應的季節變動

季節 入睡時間（分） 睡眠時間（分）
春 56.1±11.0 470±34.0
夏 93.5±11.3 242±14.3
秋 120.0±19.0 190±18.7
冬 66.5±8.2 360±33.0
不同實驗季節，動物的機體反應性有一定改變。如不同季節對輻射效應有影響。家兔的放射敏感性在春夏兩季升高，秋冬兩季降低。在狗的實驗中，在春、夏兩季照射後的死亡率比秋、冬為高。小鼠的放射敏感性，在冬季和補夏顯著升高，而初夏和夏季則降低。大鼠的放射敏感性則沒有明顯的季節性波動。因此，這種季節的波動在進行跨季度的慢性實驗時必須注意的。

三、晝夜過程
機體的有些功能還有晝夜規律性變動。例如有人給小鼠皮下重復注入40%的四氯化碳溶液0.2ml後，在同一天不同的時間將動物處死，觀察肝細胞的有絲分裂動態，以了解肝細胞變性的修復情況。結果列於表11-20。資料表明，小鼠肝細胞有絲裂的晝夜變動十分明顯。

表11-20小鼠肝細胞有絲分裂系數（‰）的晝夜變動

分組 晝夜的鍾點
0 2 4 6 7 8 9 10
實驗組 2.4±1.2 2.6±1.2 1.02±0.17 4.11±0.27 0.26±0.06 1.36±0.25 0.66±0.25 0.57±0.08
對照組 2.8±1.86 2.6±0.16 0.2±0 6.3±1.48 0.46±0.07 0.26±0.07 0.97±0.05 0.66±0.04
動物對照射的敏感性在晝夜間有不同的變化，這種變化見於不同性別、種系和年齡的小鼠和大鼠。白天放射敏感性降低（死亡較少，LD50/30較高，體重下降較少，肝臟損傷較輕）夜間升高。同時，在小鼠和大鼠實驗中，除了夜間（21～24點）的高峰外，還發現白天（小鼠9～12點，大鼠15點）損傷加重情況。下午和後半夜射敏感性最低。大鼠與小鼠不同，其放射敏感性雖有晝夜間的明顯波動，但不很劇烈。經實驗證明實驗動物的體溫、血糖、基礎代謝率、內分泌激素的分泌均發生晝夜節律性變化。因此這類實驗的觀察必須設有相應的對照，並注意實驗中某種處理的時間順序結果的影響。為了得到可比性的實驗結果，所有實驗組動物應在同一時間內進行照射或其它實驗處理。

四、麻醉濃度
動物實驗中往往需要將動物麻醉後才能進行各種手術和實驗。要求麻醉濃度要適度，而且在整個實驗過程中要保持始終恆定。因此不能不分別實驗要求和動物品種（或品系）而用同一種麻醉劑，也不能亂用麻醉劑。因為不同的麻醉劑有不同的葯理作用和副作用，應根據實驗要求與動物種類而加以選擇，使用合適。麻醉濃度的控制是順利完成實驗獲得正確實驗結果的保證。如果麻醉過深，動物處於濃度抑制，甚至瀕死狀態，動物各種正常反應受到抑制，那是不會做出可靠的實驗結果的。麻醉過淺，在動物身上進行手術或實驗，將會引起強烈的疼痛刺激，使動物全身，特別是呼吸，循環功能發生改變，消化功能也會發生改變，如疼痛刺激會反射性的長時間中止胰腺的分泌。所以麻醉濃度必須合適。由此也不難理解在整個實驗中保持麻醉濃度的始終一致是如何必要了，因為麻醉濃度的變動，會使實驗結果產生前後不一致的變化，給實驗結果帶來了難以分析的誤差。

五、手術技巧
動物實驗中除了要注意選擇合適的實驗動物，用的試劑要純粹，儀器要靈敏，方法要准確外，還必須注意手術技巧，即操作技術的熟練。手術熟練可以減少對動物的刺激，動物受的創傷、

B. 在做動物實驗時,怎麼做才能使動物不至於那麼痛苦的死去

實施實驗動物安樂死的方法

動物實驗結束後為了減輕動物的疼痛及痛苦此時從人道主義的觀點出發可以對這些動物實施安樂死實施安樂死時有一些特殊的要求需要考慮最重要的是安樂死的方法必須人道動物實驗中有時為了獲得動物組織器官進行研究。安樂死的方法應該對動物的組織器官的研究沒有影響。另外實施安樂死的方法還要可靠有效經濟容易實施對實驗人員必須安全。

常用的實施安樂死的方法為葯物化學法

是指用一種葯物或其他化合物處死動物。最常用的是使用過量的全身麻醉劑。使動物心跳停止。呼吸衰竭而死亡。戊巴比妥相對來說作用迅速給葯簡單價格低廉。是常用的實施安樂死選擇的葯物腹腔或靜脈注射過量的戊巴比妥（100～150mg／kg)即可巴比妥酸鹽可致血管擴張。引起器官淤血，可能影響組織學研究。用於安樂死的吸入麻醉劑有乙醚氟烷恩氟烷和異氟烷等。

CO2也常被用做安樂死的吸入劑。將動物放置含有100％CO2的環境中很多種動物就產生嚴重的呼吸困難而死亡。用這種方法處死動物時動物意識清醒能感受到痛苦不是理想的方法。

如果將動物放置在一定濕度C02和O2的比例為6：4的混合氣體環境中等動物逐漸喪失意識後將CO2濃度升至100％。在最少保持10min以確定動物死亡這時動物完全是在無意識狀態下死亡的死亡需30～60min。如果時間太長則不是首選的方法。CO2等吸入劑能誘發動物肺水腫可能影響其後研究中對動物組織器官的利用。

C. 動物實驗過程中應注意的問題有哪些方面，越詳細越好，先謝了！

1、動物來源（最重要）。
1》健康
2》品種純
3》最好用途專一
2、雙盲實驗
3、飼養條件，飼養條件對實驗結果影響極大。

祝樓主實驗順利！

D. 如何做好實驗動物與動物實驗中生物危害的防護工作

各級生物安全實驗室防護的實驗對象和防護措施簡單介紹如下：
(一)一級生物安全防護(BSL-1)適用實驗對象和防護措施
已知對健康成年人無致病作用，對實驗室工作人員和環境的潛在危害很小。防護措施：工作人員進入實驗室應穿工作服，實驗操作時應戴手套，必要時佩戴防護眼鏡。離開實驗室時工作服必須脫下並留在實驗區內。不得穿著進入辦公區等清潔區域。用過的工作服應定期消毒。

(二)二級生物安全防護(BSL-2)適用實驗對象和防護措施
實驗對象：對人體和環境有中等危害或具有潛在危險的致病因子。防護措施：除符合BSL-l的要求外，還應該符合下列要求：進入實驗室時，應在工作服外加罩衫或穿防護服，戴帽子、口罩。一次性手套不得清洗和再次使用。當微生物的操作不可能在生物安全櫃內進行，而必須採取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，應使用面部保護裝置(如：護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設備)。

(三)三級生物安全防護(BSL-3)適用實驗對象和防護措施
實驗對象：是通過呼吸途徑使人感染導致嚴重的甚至是致死性疾病的感染性材料。防護措施：除符合BSL-2的要求外還應該符合下列要求：①工作人員在進入實驗室時必須使用個體防護裝備，包括兩層防護服、兩層手套、生物安全專業防護口罩(不應使用醫用外科口罩等)，必要時佩戴眼罩、呼吸保護裝置等。工作完畢必須脫下工作服，不得穿工作服離開實驗室。可再次使用的工作服必須先消毒後清洗。②在實驗室中必須配備有效的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，且易於取用。實驗室區域內應配備應急葯品。

(四)四級生物安全防護(BSL-4)適用實驗對象和防護措施
實驗對象：是危險的和新的感染性材料，表現出通過氣溶膠途徑傳播實驗室感染和致命疾病的高度危險性。防護措施：除符合BSL-3的要求外，還應該符合下列要求：所有工作人員進入BSL-4實驗室時要更換全套服裝。工作後脫下所有防護服，淋浴後再離去。在BSL-4實驗室中工作人員需穿著整體的由生命維持系統供氣的正壓工作服或使用Ⅲ及生物安全櫃操作病原。

E. 有請動物實驗高手~~~~

必須在腹股溝嗎？我們的大小鼠靜脈注射都採用尾靜脈。至於確定是否重復注射，比如麻醉劑一般是根據體重摺算好量後，注射計算量的80%-90%，然後等待一兩分鍾看反應，麻了就不用補了，不然就再打到計算量，再等待。
腹股溝么，沒經驗，背位綁定後絞了毛，用指甲輕輕彈彈讓血管凸出來會比較好注射吧？這些小動物小角度進針後很容易判斷是否在血管里的，然後再慢慢推葯。我們打兔子是這么打的……對不起！我真的沒打過腹股溝……

以下來自
http://www.bioon.com/experiment/General1/86203.shtml

1. 將小鼠固定好,將尾巴拉直，綳緊，這是成功的第一步。

小鼠性情較溫順，一般不會咬人，比較容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上，在小鼠向前掙扎爬行時，用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚，將小鼠置於左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部，即可將小鼠完全固定。在一些特殊的實驗中，如進行尾靜脈注射時，可使用特殊的固定裝置進行固定,如尾靜脈注射架或粗的玻璃試管。如要進行手術或心臟采血應先行麻醉再操作,如進行解剖實驗則必須先行無痛處死後再進行。

或者用這個方法：1 小鼠要固定好，自製一個籠子，前面通氣，中間最好有一個擋板，讓小鼠不能後退，筒子後面開一個口，尾巴從這里出來，這樣固定牢靠；2、注射前尾巴用稍熱的水浸泡幾分鍾，有利於注射；3、先遠後盡，不要一開始就從尾根部，那樣失敗了不好辦；4、進血管後注意保持穩定，針尖很容易刺穿血管的。至於能否穿進，個人手感如何，全靠自己啦。多練習，一定很快掌握的，不難，絕對不難！我練習10餘只小鼠就比較熟練了

2. 用酒精棉球擦拭尾巴,使血管擴張;或者用熱水或者熱毛巾焐熱，使靜脈擴張；選用適當的針頭，越細越好；在尾部較靠近上段的地方注射，這里血管比較大。用酒精或熱水擦拭，擦拭的時候，可把尾巴用力扯在桌面上。注射狀態為尾巴發白，緊靠白色的尾骨兩側清晰可見兩根紅色靜脈。
3.用左手的食指,中指,無名指及大拇指將小鼠尾巴固定,; 手法：握住1ml注射器前面0.1ml處。右手小指搭在拽著鼠尾的左手拇指處 按此手形進針；看針尖前面那個斜面有3/4（關鍵），如果血管充盈則進1/2，進入，停，上挑針頭，進針；左右輕擺動，如可動，可注射。
原則是：把你第一次打進的手形，完全固定下來，每次都重復。
4.注射:注射時左手扯尾，使尾巴緊貼桌面，尾巴與桌邊緊貼轉彎處為進針部位，一般選擇距尾尖1/4或1/3處進針，此處皮膚較薄，血管清晰，進針容易。進針時針頭與桌面平行，針尖稍稍朝下，從中指及無名指與拇指接觸處稍上方進針，一旦進入，須將針頭稍稍上挑進入，針頭沿血管進入，肉眼可關察到針頭前進。如果針頭在血管中前進，可明顯地感覺到針行通暢，毫無阻力。若針頭不在血管中，手感針行有阻力，有一種堵的感覺。進針時不要太深，針頭入皮膚後馬上把針頭略往上，平行進針，針扎入時有落空感，推液時無阻力則說明成功了！如針頭處出現皮丘則說明在皮下，推出重來。進針處最好在尾巴的1/3-1/2處，甚至可以更下一點。這樣一次失敗了還可以往上再來，不要馬上在最高處打，因為你們要打這么多天。要為以後作準備。用熱水、酒精、紅外都可以擴張血管。可以視情況而用。總而言之，最重要的是「熟能生巧」。你最好先練習一下或請高手相助。不然到了最後幾天，真的很難打的。

2。注射：針進入後，切記手不可發抖，因為血管壁非常薄，容易扎穿。推葯時，要緩推。若進針成功，推葯順暢，無阻力；若推葯時感覺有阻力，說明針頭不在血管中，須及時拔出，重新進針。一般選用4號或4號半針頭。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾靜脈注射並不難，主要是一種感覺。若用上十隻鼠練手，你必會找到感覺。心要靜，手要穩，要有耐心。我研一的時候尾靜脈注射讓我頭疼萬分，越急越打不進去。後來靜下心來，邊注射邊找感覺，很快就熟練了。
祝你找到感覺

5.通過看有無回血來測試針是否在靜脈內;

6.注射.
做到以上步驟,保證注射成功!

註：（1）如果做細胞移植時，應該盡量把細胞打散，不然很容易引起栓塞！

（2）練習：建議你先用藍墨水練手，因為新手往往看不出打入的是皮下還是靜脈
其實真的只能熟能生巧一般推薦在尾下1/3處進針，但是我覺得1/2處准確度較好，個人經驗針頭可以插深入些，防止意外擺動戳破靜脈而注入皮下，很多時候你覺得進了血管打的卻是皮下，就是因為這個原因。

或者用：經常尾經脈注射胎盤蘭，比較容易，靜脈在側面比較粗的那個，可以做個容器，我們是用一個50ml的離心管前面弄個開口，後面的螺蓋弄個洞，把老鼠裝進去，比較容易，把都對准管小鼠自動進去，把尾巴從蓋子的洞穿出來，操作極為方便。刮毛，用熱水燙一下，血管漲起來就可以，具體的感覺還要自己實踐一下掌握，不過還容易，有3－4隻就可以掌握。

（3）規律：動物越小越好操作，小鼠比大鼠容易，幼年大鼠比成年大鼠容易；對於小鼠最好還是尾靜脈注射，這樣損傷最小；成年大鼠實在不行可以選股靜脈注射，相對要容易一些；最重要的一點，必須多練，進針時的那種感覺必須自己好好體會，熟能生巧，這是常識。

F. 動物實驗是如何進行的

雖然，很多人都受惠於動物實驗的結果，但是對動物實驗是如何開展的並不十分了解。本文介紹常規的實驗動物實驗的開展情況，提供相關的科普知識的同時，也對即將在GIBH開展動物實驗的人員以指導。 一、實驗可能參與的人員動物實驗做為生物醫學研究的一個重要部分，它涉及到許多領域。通常一個實驗需要來自不同專業背景的人員，可能包括獸醫、醫生、病理學家、計算機科學家、工程師、動物保健技術人員、科研技術人員、以及不同領域科學家。團隊的大小取決於研究需要。通常一個團隊包括首席研究員，聯合協調員，研究技術人員，實驗動物獸醫，實驗動物技術員，還包括商業動物供應商和設備製造商以及機構的實驗動物管理委員會（IACUC）。首席研究員（PI）作為主要研究者是計劃和協調所有階段的研究工作的科學家。提供研究思路，投資實驗和解釋數據並負責發表研究結果報告。實驗動物獸醫從事動物保健活動，制訂各種規章制度，包括對內、對外的管理制度和各項標准操作程序（SOP）；並確保實驗遵守各種法規和政策和動物福利保障。聯合協調員和研究技術員負責聯合調查和研究履行協議所需的具體的研究任務。協調研究小組與動物實驗中心的一些事務，包括動物實驗申請、動物申購、動物實驗操作等。動物技術人員執行許多動物保健工作，是維護健康的動物的關鍵。他們可以控制產生不利影響的實驗數據，如：清潔時間表，衛生程序，飼料和墊料，濕度，熱，光，或噪音的差異，控制不良因素的干擾。他們在獸醫指導下確保動物得到適當的醫療照顧。機構實驗動物管理委員會（IACUC）負責監督動物研究計劃。IACUCs審查研究協議，要求使用的動物，以確保動物護理和使用的方法適當，並在遵守法規和制度的政策或既定的作業程序。他們每年兩次對動物設施進行檢查和評估機構內的動物保健計劃，並報告他們的發現和改正不足之處，以制訂的正式計劃。在體制層面，IACUC和動物實驗中心負責人需要對有特殊需求的實驗進行論證可行性，並施加必要的控制，以確保優質動物保健和實驗的安全性和科學性。 二、研究計劃一項研究計劃，在開始之前，科學家必須寫一個詳細的擬進行動物實驗的研究大綱。這份文件，被稱為動物實驗方案。

G. 請問做動物實驗前，都需做那些准備工作啊感謝！

設計實驗方案，要詳細一些，如果是解剖，要先了解實驗動物的基本構造，下刀的位置等。可以准備實驗用的白大褂以防心愛的衣服被弄臟，怕臟的話可以准備手套。如果只是觀察草履蟲什麼的，可以不用。實驗畫圖很重要，筆紙橡皮什麼的事先也要准備好。做解剖似乎還要做點心理准備，微微有點血腥。其實最重要的還是了解實驗要做什麼，怎麼做，同時注意衛生安全。

H. 如何做好動物實驗

方法/步驟
實驗標題：闡述本實驗的核心.
實驗時間：主要是實驗開始和結束的時間,一般在實驗設計的時候已經擬好.
實驗編號：這是進行系統管理和實驗記錄檢索的一個非常有效的方法.不過可以用實驗時間代替,也可以用實驗標題代替.
實驗目的：主要闡述此實驗的目標結果.
實驗材料：按照材料或試劑名稱,公司,規格,貨品編號將實驗中用到的每一個器材和試劑均註明.
實驗步驟：分時間段和實驗先後步驟詳細闡述實驗中的每一步,越詳細越好.
7
實驗結果：原始記錄實驗中產生的所有數據和圖像.
8
結果分析：對實驗結果進行分析闡述,對本次實驗做總結.
END
注意事項
實驗數據不可人為隨意更改.
結果討論應該客觀,並且依據實驗結果,做到有理有據.
應該一邊做實驗一邊記錄實驗步驟和數據,不可後續之後再憑借記憶進行更改.容易出現錯誤.