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動物隔離器如何運行

發布時間:2022-07-08 17:54:17

A. 無菌動物的實驗動物

用大量抗菌素的普通動物非無菌動物。因為這種無菌狀態往往是一過性的,某些殘存的細菌在適當的條件下又會在體內增殖;即使能把體內細菌全部殺死,它們給動物造成的影響卻是無法消除的,例如:特異性抗體的存在、網狀內皮膚系統的活化、某些組織或器官的病理變化等。因此,無菌動物必須是生來就無菌的動物。
按對微生物的控製程度,可以將實驗動物分為四類,即:
(1)無菌動物(Germ Free,GF);
(2)悉生動物或已知菌動物(Gnotobiotics,GN);
(3)無特定病原體動物(Specific Pathogen Free,SPF);
(4)通常動物(Conventional,CV)。
無菌動物和悉生動物飼養於隔離器中(隔離系統),無特殊病原體動物飼養於屏障系統,通常動物飼養於開放系統。

B. 動物園之星隔離區怎麼用

隔離區是為了讓玩家躲避魔獸等傷害的,在有魔獸追殺的時候可以躲進去。

C. 實驗室的BL1、BL2,還有BSL1、BSL2、BSL3等是什麼意思呢,還有ABSL1、ABSL2等等

BL和BSL都是生物安全防護實驗室biosafety laboratory的縮寫。

其後面的數字表達的是安全防護等級。BL1/BSL1就表達的是生物安全防護等級一級實驗室,其它的數字同理。

依據實驗室所處理對象的生物危險程度,把生物安全實驗室分為四級,其中一級對生物安全隔離的要求最低,四級最高。

ABSL表達的是animal biosafety laboratory,意思是動物生物安全防護實驗室,後面的數字也表達的是安全防護等級。


(3)動物隔離器如何運行擴展閱讀:

生物安全實驗室一般實施兩級隔離。一級隔離通過生物安全櫃、負壓隔離器、正壓防護服、手套、眼罩等實現;二級隔離通過實驗室的建築、空調凈化和電氣控制系統來實現。二級~四級生物安全實驗室應實施兩級隔離。

生物安全主實驗室二級隔離的主要技術指標應符合表1.2的規定。本表中的雜訊不包括生物安全櫃、動物隔離器的雜訊,如果包括上述設備的雜訊,則最大不應超過68 dB(A)。

三級生物安全實驗室主實驗室相對於大氣的最小負壓不得小於-30Pa,四級生物安全實驗室主實驗室相對於大氣的最小負壓不得小於-50Pa。

對於飼養動物的三級生物安全實驗室主實驗室,其相對於大氣的最小負壓不得小於-50Pa;動物四級生物安全實驗室主實驗室相對於大氣的最小負壓不應小於-60Pa。

動物生物安全實驗室的參數應符合GB14925-2001《實驗動物 環境及設施》的有關要求。

參考資料:網路-生物安全實驗室

D. 根據《動物防疫法》 對動物進行隔離管理應該採取哪些措施

進境動物隔離檢疫場使用監督管理辦法

第一章 總則

第一條 為做好進境動物隔離檢疫場(以下簡稱隔離場)的管理工作,根據《中華人民共和國進出境動植物檢疫法》及其實施條例等法律法規的規定,制定本辦法。

第二條 本辦法所稱隔離場是指專用於進境動物隔離檢疫的場所。包括兩類,一是國家質量監督檢驗檢疫總局(以下簡稱國家質檢總局)設立的動物隔離檢疫場所(以下簡稱國家隔離場),二是由各直屬檢驗檢疫局指定的動物隔離場所(以下簡稱指定隔離場)。

第三條 申請使用隔離場的單位或者個人(以下簡稱使用人)和國家隔離場或者指定隔離場的所有單位或者個人(以下簡稱所有人)應當遵守本辦法的規定。

第四條 國家質檢總局主管全國進境動物隔離場的監督管理工作。

國家質檢總局設在各地的出入境檢驗檢疫機構(以下簡稱檢驗檢疫機構)負責轄區內進境動物隔離場的監督管理工作。

第五條 隔離場的選址、布局和建設,應當符合國家相關標准和要求。

相關標准與要求由國家質檢總局另行發文明確。

第六條 使用國家隔離場,應當經國家質檢總局批准。使用指定隔離場,應當經所在地直屬檢驗檢疫局批准。

進境種用大中動物應當在國家隔離場隔離檢疫,當國家隔離場不能滿足需求,需要在指定隔離場隔離檢疫時,應當報經國家質檢總局批准。

進境種用大中動物之外的其他動物應當在國家隔離場或者指定隔離場隔離檢疫。

第七條 進境種用大中動物隔離檢疫期為45天,其他動物隔離檢疫期為30天。

需要延長或者縮短隔離檢疫期的,應當報國家質檢總局批准。

第二章 使用申請

第八條 申請使用國家隔離場的,使用人應當向國家質檢總局提交如下材料:

(一)填制真實准確的《中華人民共和國進境動物隔離檢疫場使用申請表》;

(二)使用人(法人或者自然人)身份證明材料復印件;

(三)對外貿易經營權證明材料復印件;

(四)進境動物從入境口岸進入隔離場的運輸安排計劃和運輸路線;

(五)國家質檢總局要求的其它材料。

第九條 申請使用指定隔離場的,使用人應當在辦理《中華人民共和國進境動植物檢疫許可證》前,向所在地直屬檢驗檢疫局提交如下材料:

(一)填制真實准確的《中華人民共和國進境動物隔離檢疫場使用申請表》;

(二)使用人(法人或者自然人)身份證明材料復印件;

(三)對外貿易經營權證明材料復印件;

(四)隔離場整體平面圖及顯示隔離場主要設施和環境的照片;

(五)隔離場動物防疫、飼養管理等制度;

(六)由縣級或者縣級以上獸醫行政主管部門出具的隔離場所在地未發生《中華人民共和國進境動物一、二類傳染病、寄生蟲病名錄》、《中華人民共和國一、二、三類動物疫病病種名錄》中規定的與隔離檢疫動物相關的一類動物傳染病證明;

(七)進境動物從入境口岸進入隔離場的運輸安排計劃和運輸路線;

(八)當隔離場的使用人與所有人不一致時,使用人還須提供與所有人簽訂的隔離場使用協議;

(九)檢驗檢疫機構要求的其它材料。

第十條 國家質檢總局、直屬檢驗檢疫局應當按照規定對隔離場使用申請進行審核。

隔離場使用人申請材料不齊全或者不符合法定形式的,應當當場或者在5個工作日內一次告知使用人需要補正的全部內容,逾期不告知的,自收到申請材料之日起即為受理。

受理申請後,國家質檢總局、直屬檢驗檢疫局應當根據本辦法規定,對使用人提供的有關材料進行審核,並對申請使用的隔離場組織實地考核。

申請使用指定隔離場用於隔離種用大中動物的,由直屬檢驗檢疫局審核提出審核意見報國家質檢總局批准;用於種用大中動物之外的其他動物隔離檢疫的,由直屬檢驗檢疫局審核、批准。

第十一條 國家質檢總局、直屬檢驗檢疫局應當自受理申請之日起20個工作日內做出書面審批意見(現場考核評審時間不計入20個工作日內)。經審核合格的,直屬檢驗檢疫局受理的,由直屬檢驗檢疫局簽發《隔離場使用證》。國家質檢總局受理的,由國家質檢總局在簽發的《中華人民共和國進境動植物檢疫許可證》中列明批准內容。20個工作日內不能做出決定的,經本機構負責人批准,可以延長10個工作日,並應當將延長期限的理由告知使用人。其他法律、法規另有規定的,依照其規定執行。

不予批準的,應當書面說明理由,告知申請人享有依法申請行政復議或者提起行政訴訟的權利。

第十二條 《隔離場使用證》有效期為6個月。

隔離場使用人憑有效《隔離場使用證》向隔離場所在地直屬檢驗檢疫局申請辦理《中華人民共和國進境動植物檢疫許可證》。

第十三條 《隔離場使用證》的使用一次有效。

同一隔離場再次申請使用的,應當重新辦理審批手續。兩次使用的間隔期間不得少於30天。

第十四條 已經獲得《隔離場使用證》,發生下列情形之一時,隔離場使用人應當重新申請辦理:

(一)《隔離場使用證》超過有效期的;

(二)《隔離場使用證》內容發生變更的;

(三)隔離場設施和環境衛生條件發生改變的。

第十五條 已經獲得《隔離場使用證》,發生下列情況之一時,由發證機關撤回:

(一)隔離場原有設施和環境衛生條件發生改變,不符合隔離動物檢疫條件和要求的;

(二)隔離場所在地發生一類動物傳染病、寄生蟲病或者其他突發事件的。

第十六條 使用人以欺騙、賄賂等不正當手段取得《隔離場使用證》的,檢驗檢疫機構應當依法將其《隔離場使用證》撤銷。

第三章 檢疫准備

第十七條 隔離場經批准使用後,使用人應當做好隔離場的維護,保持隔離場批准時的設施完整和環境衛生條件,保證相關設施的正常運行。

第十八條 動物進場前,檢驗檢疫機構應當派員實地核查隔離場設施和環境衛生條件的維護情況。

第十九條 使用人應當確保隔離場使用前符合下列要求:

(一)動物進入隔離場前10天,所有場地、設施、工具必須保持清潔,並採用檢驗檢疫機構認可的有效方法進行不少於3次的消毒處理,每次消毒之間應當間隔3天;

(二)應當准備供動物隔離期間使用的充足的飼草、飼料和墊料。飼草、墊料不得來自嚴重動物傳染病或者寄生蟲病疫區,飼料應當符合法律法規的規定,並建立進場檢查驗收登記制度;

飼草、飼料和墊料應當在檢驗檢疫機構的監督下,由檢驗檢疫機構認可的單位進行熏蒸消毒處理;

水生動物不得飼喂鮮活餌料,遇特殊需要時,應當事先徵得檢驗檢疫機構的同意;

(三)應當按照檢驗檢疫機構的要求,適當儲備必要的防疫消毒器材、葯劑、疫苗等,並建立進場檢查驗收和使用登記制度;

(四)飼養人員和隔離場管理人員,在進入隔離場前,應當到具有相應資質的醫療機構進行健康檢查並取得健康證明。未取得健康證明的,不準進入隔離場。健康檢查項目應當包括活動性肺結核、布氏桿菌病、病毒性肝炎等人畜共患病;

(五)飼養人員和管理人員在進入隔離場前應當接受檢驗檢疫機構的動物防疫、飼養管理等基礎知識培訓,經考核合格後方可上崗;

(六)人員、飼草、飼料、墊料、用品、用具等應當在隔離場作最後一次消毒前進入隔離檢疫區;

(七)用於運輸隔離檢疫動物的運輸工具及輔助設施,在使用前應當按照檢驗檢疫機構的要求進行消毒,人員、車輛的出入通道應當設置消毒池或者放置消毒墊。

第四章 隔離檢疫

第二十條 經入境口岸檢驗檢疫機構現場檢驗檢疫合格的進境動物方可運往隔離場進行隔離檢疫。

第二十一條 檢驗檢疫機構對隔離場實行監督管理,監督和檢查隔離場動物飼養、防疫等措施的落實。對進境種用大中動物,隔離檢疫期間實行24小時檢驗檢疫機構工作人員駐場監管。

第二十二條 檢驗檢疫機構工作人員、隔離場使用人應當按照要求落實各項管理措施,認真填寫《進出境動物隔離檢疫場檢驗檢疫監管手冊》。

第二十三條 檢驗檢疫機構負責隔離檢疫期間樣品的採集、送檢和保存工作。隔離動物樣品採集工作應當在動物進入隔離場後7天內完成。樣品保存時間至少為6個月。

第二十四條 檢驗檢疫機構按照國家質檢總局的有關規定,對動物進行臨床觀察和實驗室項目的檢測,根據檢驗檢疫結果出具相關的單證,實驗室檢疫不合格的,應當盡快將有關情況通知隔離場使用人並對陽性動物依法及時進行處理。

第二十五條 檢驗檢疫機構按照國家質檢總局相關的規定對進口動物進行必要的免疫和預防性治療。隔離場使用人在徵得檢驗檢疫機構同意後可以對患病動物進行治療。

第二十六條 動物隔離檢疫期間,隔離場使用人應當做到:

(一)門衛室實行24小時值班制,對人員、車輛、用具、用品實行嚴格的出入登記制度。發現有異常情況及時向檢驗檢疫機構報告;

(二)保持隔離場完好和場內環境清潔衛生,做好防火、防盜和滅鼠、防蚊蠅等工作;

(三)人員、車輛、物品出入隔離場的應當徵得檢驗檢疫機構的同意,並採取有效的消毒防疫措施後,方可進出隔離區;人員在進入隔離場前15天內未從事與隔離動物相關的實驗室工作,也未參觀過其它農場、屠宰廠或者動物交易市場等;

(四)不得將與隔離動物同類或者相關的動物及其產品帶入隔離場內;

(五)不得飼養除隔離動物以外的其它動物。特殊情況需使用看門犬的,應當徵得檢驗檢疫機構同意。犬類動物隔離場,不得使用看門犬;

(六)飼養人員按照規定作息時間做好動物飼喂、飼養場地的清潔衛生,定期對飼養舍、場地進行清洗、消毒,保持動物、飼養舍、場區和所有用具的清潔衛生,並做好相關記錄;

(七)隔離檢疫期間所使用的飼料、飼料添加劑與農業投入品應當符合法律、行政法規的規定和國家強制性標準的規定;

(八)嚴禁轉移隔離檢疫動物和私自採集、保存、運送檢疫動物血液、組織、精液、分泌物等樣品或者病料。未經檢驗檢疫機構同意,不得將生物製品帶入隔離場內,不得對隔離動物進行葯物治療、疫苗注射、人工授精和胚胎移植等處理;

(九)隔離檢疫期間,嚴禁將隔離動物產下的幼畜、蛋及乳等移出隔離場;

(十)隔離檢疫期間,應當及時對動物欄舍進行清掃,糞便、墊料及污物、污水應當集中放置或者及時進行無害化處理。嚴禁將糞便、墊料及污物移出隔離場;

(十一)發現疑似患病或者死亡的動物,應當立即報告所在地檢驗檢疫機構,並立即採取下列措施:

1. 將疑似患病動物移入患病動物隔離舍(室、池),由專人負責飼養管理;

2. 對疑似患病和死亡動物停留過的場所和接觸過的用具、物品進行消毒處理;

3. 禁止自行處置(包括解剖、轉移、急宰等)患病、死亡動物;

4. 死亡動物應當按照規定作無害化處理。

第二十七條 隔離檢疫期間,隔離場內發生重大動物疫情的,應當按照《進出境重大動物疫情應急處置預案》處理。

第五章 後續監管

第二十八條 隔離場使用完畢後,應當在檢驗檢疫機構的監督下,作如下處理:

(一)動物的糞便、墊料及污物、污水進行無害化處理確保符合防疫要求後,方可運出隔離場;

(二)剩餘的飼料、飼草、墊料和用具等應當作無害化處理或者消毒後方可運出場外;

(三)對隔離場場地、設施、器具進行消毒處理。

第二十九條 隔離場使用人及隔離場所在地檢驗檢疫機構應當按照規定記錄動物流向和《隔離場檢驗檢疫監管手冊》,檔案保存期至少5年。

第三十條 種用大中動物隔離檢疫結束後,承擔隔離檢疫任務的直屬檢驗檢疫局應當在2周內將檢疫情況書面上報國家質檢總局並通報目的地檢驗檢疫機構。檢疫情況包括:隔離檢疫管理、檢疫結果、動物健康狀況、檢疫處理情況及動物流向。

第六章 法律責任

第三十一條 動物隔離檢疫期間,隔離場使用人有下列情形之一的,由檢驗檢疫機構按照《進出境動植物檢疫法實施條例》第六十條規定予以警告;情節嚴重的,處以3000元以上3萬元以下罰款:

(一)將隔離動物產下的幼畜、蛋及乳等移出隔離場的;

(二)未經檢驗檢疫機構同意,對隔離動物進行葯物治療、疫苗注射、人工授精和胚胎移植等處理;

(三)未經檢驗檢疫機構同意,轉移隔離檢疫動物或者採集、保存其血液、組織、精液、分泌物等樣品或者病料的;

(四)發現疑似患病或者死亡的動物,未立即報告所在地檢驗檢疫機構,並自行轉移和急宰患病動物,自行解剖和處置患病、死亡動物的;

(五)未將動物按照規定調入隔離場的。

第三十二條 動物隔離檢疫期間,隔離場使用人有下列情形之一的,由檢驗檢疫機構予以警告;情節嚴重的,處以1萬元以下罰款:

(一)人員、車輛、物品未經檢驗檢疫機構同意,並未採取有效的消毒防疫措施,擅自進入隔離場的;

(二)飼養隔離動物以外的其他動物的;

(三)未經檢驗檢疫機構同意,將與隔離動物同類或者相關動物及其產品、動物飼料、生物製品帶入隔離場內的。

第三十三條 隔離場使用完畢後,隔離場使用人有下列情形的,由檢驗檢疫機構責令改正;情節嚴重的,處以1萬元以下罰款:

(一)未在檢驗檢疫機構的監督下對動物的糞便、墊料及污物、污水進行無害化處理,不符合防疫要求即運出隔離場的;

(二)未在檢驗檢疫機構的監督下對剩餘的飼料、飼草、墊料和用具等作無害化處理或者消毒後即運出隔離場的;

(三)未在檢驗檢疫機構的監督下對隔離場場地、設施、器具進行消毒處理的。

第三十四條 隔離場檢疫期間,有下列情形之一的,由檢驗檢疫機構對隔離場使用人處以1萬元以下罰款:

(一)隔離場發生動物疫情隱瞞不報的;

(二)存放、使用我國或者輸入國家/地區禁止使用的葯物或者飼料添加劑的;

(三)拒不接受檢驗檢疫機構監督管理的。

第三十五條 隔離場使用人有下列違法行為之一的,由檢驗檢疫機構按照《進出境動植物檢疫法實施條例》第六十二條規定處2萬元以上5萬元以下的罰款;構成犯罪的,依法追究刑事責任:

(一)引起重大動物疫情的;

(二)偽造、變造動物檢疫單證、印章、標志、封識的。

第七章 附則

第三十六條 我國與進口國家/地區政府主管部門簽署的議定書中規定或者進口國家/地區官方要求對出境動物必須實施隔離檢疫的,出境動物隔離檢疫場使用監督工作按照進口國的要求並參照本辦法執行。

第三十七條 本辦法由國家質檢總局負責解釋。

第三十八條 本辦法所列各類表格及證書式樣另行發布。

第三十九條 本辦法自2009年12月10日起施行。

E. 狂犬病毒培養或動物感染實驗應在哪一級

狂犬病毒培養或動物感染實驗應在BSL-3或ABSL-3。

一般學校里都會有生物實驗室,醫院的驗血實驗室也是生物安全實驗室。通常進到生物實驗室里都是為了學習和研究,而按照研究對象的不同而進行分級,一共分為四級。

相關信息:

生物安全實驗室一般實施兩級隔離。一級隔離通過生物安全櫃、負壓隔離器、正壓防護服、手套、眼罩等實現;二級隔離通過實驗室的建築、空調凈化和電氣控制系統來實現。三級~四級生物安全實驗室應實施兩級隔離。

生物安全主實驗室二級隔離的主要技術指標應符合表1.2的規定。本表中的雜訊不包括生物安全櫃、動物隔離器的雜訊,如果包括上述設備的雜訊,則最大不應超過68 dB(A)。

以上內容參考:

網路-生物安全實驗室

F. 關於裸鼠的繁育,具體

由於裸鼠原種抵抗力差,生育力低,壽命短,不能用於實際。因此人們又致力於育種改造,分別和純系BALB/C,C3H,C57BL/6小鼠交配,不斷選育,獲得了三種近交系無胸腺裸體動物(Inbred Nuede Mice)新種,雖然某些生物學性狀有所改善,但尚未克服上述缺點,故又將近交系BALB/C裸鼠和NIH瑞士種小鼠交配獲得遠交系無胸腺裸體小鼠(Outbred Nude Mice),從而克服了上述缺點,能夠大量繁殖與推廣。
裸鼠的飼料和繁殖要求條件比較嚴格,我國已有這方面的經驗報導。國外一些國家經過一段時間的摸索,1969年裡加德(Rygaard)和Ffiis報告採用無特定病原體(簡稱SPF)級定義裸鼠級別。飼養條件為屏障系統或隔離系統,但也發生傳染性疾病。近十年來,許多國家建立了自己的有封閉屏障系統的飼料設施以及相應的質量控制辦法,進一步促進了裸鼠研究工作的迅速發展。1978年根據英國LAc News的報告,除用「nu」基因導入近交小鼠的方法成功地培育成千餘種遺傳背景明確的裸鼠外,還培育了無胸腺肥胖裸鼠,無胸腺無脾臟裸鼠以及裸體大鼠等,預計不久的將來,根據不同的實驗需要,將會培育出更多的無胸腺雜交品系。目前,已成立了國際性專門組織一國際裸鼠管理及應用委員會,並分別在1973年、1976年1979年召開了三次裸鼠會議。我國實驗動物工作者過去在小鼠的大量繁殖中也曾發現過無毛小鼠,但未進行研究。最近三、四年來,由於科研工作的需要從國外引起了裸鼠。1978~1980年間,中國醫學科學院所屬單位曾先後從法國、英國、美國獲得裸鼠。北京衛生部葯品生物製品檢定所在1980年從日本引進裸鼠鼠種進行了繁殖,飼料在屏障室內,經過16個月的飼料,繁殖正常,並已提供給科研工作使用。
目前繁殖裸鼠不用nu/nu雌鼠,因其繁殖性能低,一般採用雜合子交配方式或隱性純合子雄性與雜合子雌鼠交配。這種交配方法,其後代將出現表現型正常的仔鼠和裸鼠,比例為1:1。 繁殖時一般將nu基因導入C57BL/10小鼠中。在把基因導入同源(Cogenic)品系時,一般用雌性C57BL/10與雄性C57BL/10-nu(遠交株)雜交。其交配方法和結果如下: 北京葯品檢定所繁殖裸鼠用的鼠種是BALB/C-nu/nu,系1973年從丹麥引入日本中央實驗動物所研究。繼續培育三年後,交由日本CLEA株式會社進行生產。1980年由CLEA引入。雄鼠是無胸腺裸鼠(BALB/C-nu/nu),雌鼠是有胸腺的雜合小鼠(BALB/C-nu/+)。採用BALB/C-nu/+♀與BALB/C-nu/nu♂隨機交配法進行繁殖,已取得較好成果,裸鼠的生產性能良好:受胎率達81.5%,平均產仔率8.1隻/窩,平均產裸仔率3.99隻/窩,窩平均仔鼠成活3.62隻,9周齡仔鼠成活率100%,其主要項目數據與日本中央實驗動物研究所(CLEA)和英國實驗動物中心(LAC)發表的材料基本一致。
飼料條件
因為裸鼠缺乏T細胞,易受細菌、病毒和黴菌感染的損害,如按常規動物方式飼養,只有少數裸鼠能生存一個月以上,最多不超過四個月,而放在隔離器(Isolator)中飼料的可存活一年以上。因此,裸鼠的壽命與飼料的衛生條件有密切的關系。一般是先在隔離器中繁殖。然後放入無特定病原體屏障環境中飼料。 無病原體條件的飼料需要在動物和外界之間裝置一個屏障,屏障越嚴,飼料健康裸鼠就越有保證,然而,如不注意選擇屏障的類型,它的效果就沒有保證,故應持續檢查是否符合條件。 1.無病原條件飼料裸鼠設備 ⑴帶有密封空氣過濾裝置的塑料籠。每一籠自為一個單元。它包括一個標準的透明塑料籠,籠蓋上覆有空氣過濾材料。後者與籠子的貼近處用膠帶纏繞數周予以密封。然後,此籠可置於一般實驗室的標准籠架上。過濾材料呈片狀,由疏紡的(但非紡織的)聚酯纖維製成。它應該能夠防止微生物從籠外進入籠內。 全套籠具皆經高壓蒸汽滅菌。使用它和喂養管理(如加飲水和飼料、清籠、斷奶等)時,都必須在一個防護罩內進行。罩內所含有的是正壓過濾空氣。而且還是層流(無湍流的)、單向的。 上述的用具有操作方式是存養無致病原動物最簡單的方法。 ⑵動物隔離器。最常使用的此種器具有系由柔軟片狀的透明聚乙烯基塑料製成,但也可用有機玻璃、不銹鋼、鋁皮和尼龍等材料來作。市售成品有一定規格,也可專門根據需要來設計大小,這是一個無菌的生活小室,可排除任何微生物。室氣進出該器都經過濾。全部食品和用品都經滅菌後,再經一個無菌的入口小室送入器內,可排除任何微生物。最初,選用化學滅菌劑和高壓蒸氣對該器進行滅菌處理。 在無菌環境中,遺傳學背景相同的裸小鼠和通常的雜合子型小鼠壽命長短相近。但是,Poiley氏等(1974)發現,在這種環境中,新生小鼠的存活率,較之在普遍環境中的為低。為了使它們胃腸道的功能更接近於正常,有人提議給無菌環境中的裸鼠接種一次非致病的細菌(Poliey氏等,1974;Eaton等,1975)。這樣,常常可以起到改進生殖性能的作用,並有助於把無菌小鼠從隔離器中轉移到條件較差的存養設備中去。 為了最有效的控制環境,從而得以盡力保存無菌的(或帶有一定菌群)裸體小鼠,隔離器是理想的存養設備。但它也有缺點,這就是費勞力,在一定空間中繁育動物的數量有限。 ⑶空氣層流器。它包括標準的小室,覆罩和網架。每套器具形成一個獨立的環境,與室內通風系統無關。它自己輸入過濾空氣,把超凈空氣完滿地注入鼠籠,並以柱狀排出。由於每套器具互不相干,又有正壓空氣防護,所以可把它們放在通常條件下。它們是手提式的,既便於維修,又能最大限度地利用房舍和設備。 使用此種方法是否成功,取決於管理工作的好壞。密切監視房室的污染和人員流動,只准專職人員入室。應當在正壓、單向氣流條件下料理維修鼠籠,接觸小鼠的一切物品(飼料和其它物品)都必須滅菌。飲水須經處理除去細菌,專職工作者須穿戴無菌的外科口罩、帽子、手套和後長衣,觸及動物時須用頭端包有橡皮的鑷子,而且必須經變性乙醇(就放在一邊)的浸洗。 ⑷空氣層流室。有別於上述的一個房間內放置的小型空氣層流器,而是整個房間的環境都為正壓過濾空氣所籠罩。設計時,須裝置空氣進入的開關,空氣入口要裝指示器。工作人員在室內的穿戴同上所述。室內應用的飼料、墊料和籠具的滅菌,須用兩端有開關的高壓蒸氣滅菌器。 引種方法可最大限度地利用房舍以繁育動物。雖然裝設此種房間的經費昂貴,但是,空氣層流室加上嚴格限制人員的出入,可保證生育期的裸體小鼠順利生產,它是大量繁殖裸小鼠的最好方式。舉例來說,由於採用它,近五年來(1973~1977),在Frederick癌症研究中心平均每年生產裸體小鼠在20,000以上。 2.環境控制 ⑴溫度。適於裸體小鼠的室溫為26~28℃(78~820F),裸體小鼠無毛、其散失體溫較有毛小鼠為快。處於連續空氣層流中,它們的散熱更快,需要大約28℃(800F)的室溫予以補償。一般飼料室內溫度控制在25℃±1℃也可以。如果裸鼠和有毛雜合子鼠同籠飼養時室溫可略低一點。飼料在在連續空氣層流室中的裸鼠需要將層流室內溫度提高到28℃。 ⑵濕度。相對溫度應保持在40~60%,此時,成年裸體小鼠皮膚水分散失最少。濕度過低,對新生裸鼠生存不利,這在空氣層流環境中尤為重要。 ⑶通風。一般認為,每小時需要通風換氣10~15次,要用高效過濾器(99.9%)保證良好的空氣過濾,除盡空氣中大於0.3μm的顆粒。空氣出口也有過濾裝置(也可以用效能上較低的)以防止空氣倒流時的污染,而且要先設計好怎樣從室外維修這些過濾器。 在空氣層流室內,空氣的正壓至少為0.65cmH2O。空氣的流向和速度要控製得均勻而自由。過濾的空氣連續掠過鼠籠時,奔流於動物環境之中,在理論是一個防止外源性污染的屏障。 ⑷光照。每日應當維持10小時光照,14小時無光的明暗周期。不用窗戶,用人工照明,使全年光照恆定,但應避免過強的熒光燈光照。 3.籠具和墊料 培育裸體小鼠的籠具,籠底面積應當為97平方厘米(15平方吋),高度應為12.7厘米(5吋),應選可耐受高壓蒸氣滅菌的塑料或不銹鋼製作。其造型應當便於重疊,以利滅菌和存貯。透明塑料籠較好,用時不必打開籠蓋就要觀察動物。籠底要放墊料,不能用網。 籠子必須每周清潔一次,或視需要處理,以保證環境清潔、乾燥。用去污劑或其它洗滌劑清洗後的籠子或其它物品,必須充分沖洗干凈。否則,會刺激裸體小鼠的皮膚。 墊料直接接觸裸體小鼠的皮膚,不能帶有刺激性。可選用不帶塵土和尖塊的硬木屑,研磨過的玉米桿,或用松木刨花。用前都要滅菌,且滅菌後不結成塊狀才可使用。 為裸體小鼠建巢可用棉花或棉紙。但是,如果墊料有一吋厚,而且室溫控製得恰到好處,能使裸鼠感染舒適,一般就不需要墊棉花或棉紙了。 4.供食和供水 ⑴飼喂。裸體小鼠的營養需求與其它品系的小鼠相似。所以,任何市售飼料均可使用。食物必須滅菌,可將食物鋪成單層後放在小盤中或放在有孔的口袋中,進行高壓蒸氣滅菌(45分鍾,120℃)。滅菌前,不耐熱的營養素要加大用量(Williams氏等,1968)。另外,可補充全小麥麵包和復制牛奶以改進生育能力,並防止同類噬食現象(Poiley氏等,1974)。 ⑵飲水。有時,自來水中含有少量的各種非致病菌(包括銹色假單細胞菌)。為了避免經水源而污染裸體小鼠種群,有人建議將飲水過氯化達到12~15ppm;或用鹽酸酸化飲水,使之pH達到2.5~2.8,都可有效地控制其污染率,特別是假單細胞菌屬細菌的污染。如由於高壓滅菌而過多地損失維生素則可在飲水中加入復合維生素(例如,每1000ml加入1ml各種維生素),將該混合液通過直徑0.2μm微孔薄膜過濾除菌,每平方吋的壓力不得超過10磅。維生素混合液及水應適當地進行某些細菌培養的檢查,並應隔天更換水瓶,水瓶和飲水管在兩次使用之間必須洗滌和消毒。 通過飲水供給抗菌素,可消除胃腸道的細菌(Van Der Waaij氏,1966)。並且,這也是一個防止裸體小鼠在嚴格的環境控制下可能發生的外源污染的附加措施。我們使用的四種配方如表4-4所示。下列抗菌素很少消化道吸收,每一種配方應每周更換一次,每四周輪換一遍,可減少抗葯菌株的出現。 假如你一開始就在嚴格控制的環境中繁育無菌裸體小鼠,則也可以不必使用抗菌素,因為加用抗生素後在繁育技術上出現差錯的可能性也就增加了。 5.空氣層流室的保養 層流室內從地面到天花板以及設備均需保持無塵和無破碎。每月必須檢測室內的無菌情況,每平方米放一個平皿,檢查室內空氣中的細菌數量。落下菌的檢查各國規定不同, 見下表 表4-5各國層流室落下菌限度的規定 規定單位 平甲培養基 暴露時間(分) 培養時間、溫度 落下菌限度 日本 普通瓊脂 5′ 37℃ 48hr <5個 美國 血 瓊 脂 10′ ″ <3個 北京檢定所 血 瓊 脂 30′ ″ <10個 除落下菌數目不得超過限度外,並且不能有致病菌存在,否則,需要重新消毒。 一切可移動的設備最好高壓滅菌,不可移動的裝置(如牆、地板、天花板等)要用液體酚類消毒劑徹底清潔,消毒應重復進行三次。消毒後房間應密封,48小時後作微生物學污染檢測,如檢測是陰性,才允許使用。工作人員入內必須穿戴全套滅菌外科手術衣和消毒的長靴。 總之,應按生產裸鼠所有的要求進行,否則試驗不易獲得成功。 飼料繁殖裸鼠必須注意的問題: ⑴建立屏障系統是飼料繁殖裸鼠的重要條件。裸鼠先天性胸腺缺失,免疫系統不健全,缺乏對付外來因子的抵抗力,對病原體極易感染,在常規環境中,最多隻能生存數月,因此,必須要在無病原隔離飼料環境中飼料。根據我國目前實際情況,尚不能新建更多的高標準的動物實驗設施,而改造現有建築的辦法是可行的。改建後的屏障飼養室雖與科技發達國家相比是比較簡陋的,但基本上達到了屏障系統設施的要求,費用大為降低,也可使裸鼠繁殖工作正常進行。 ⑵裸鼠繁殖方法最好選用純合子隱性(nu/nu)雄鼠與雜合子(nu/+)雌鼠進行交配生產。因為純合子隱性雄鼠一般能正常生育,其仔代裸鼠和正常仔鼠的比例為1:1;所有正常的仔鼠都是雜合子,當用這些小鼠作實驗對照時,就可明顯地觀察到純合子與雜合子之間的不同差異。裸鼠繁殖的其它二種方法,均存在一定缺點,如採用雜合子(nu/+)雌雄鼠交配時,其子代中裸鼠與表現型正常的仔鼠的比例為1:3,所繁殖的裸鼠少,而且繁殖的正常小鼠可能是nu/+或+/+兩種基因的小鼠,除非通過育種,否則不易區別。又如採用純合子隱性(nu/nu)雄鼠和雌鼠交配繁殖,雖然所有的子代都是裸鼠,但這種繁育方法不很有效,因為雌裸鼠繁殖力低,同時護理也很困難。 ⑶仔鼠出生後存活與否,關鍵在於哺乳,如不注意哺乳則哺乳期裸鼠死亡率很高。主要原因在於同窩哺乳的有雜毛純合仔鼠發育快,體大健壯,競爭力強,與純合裸鼠爭食母乳而影響純合裸鼠的發育,以致其消瘦死亡。為了提高裸鼠生長發育速度及存活率,採用純合裸鼠,雜合仔鼠分別哺乳,並對雌鼠加喂高蛋白、高維生素飼料。 ⑷為了保持較長期的正常繁殖生長,就必須建立微生物監測方法來控制質量。因裸鼠免疫機能的缺陷,易受微生物、病毒和寄生蟲感染,特別是易受小鼠肝炎病毒的感染,一但裸鼠感染上小鼠肝炎,同窩裸鼠會於生後36~134天相繼死亡,無一倖免。病鼠肝發生大理石樣變化,質較硬,呈黃色、粗造、結節樣、邊緣不齊。對裸鼠的飼料繁殖威脅很大。在裸鼠的飼料中,常易發生所謂「消耗性綜合征」(Wasting syndrome)實與裸鼠常見病之一的鼠病毒性肝炎感染有密切關系,用剖腹產可避免此病毒感染。 採用微生物的檢查方法時,要考慮裸鼠的生理特性,裸鼠屬於免疫機能缺陷的動物,鼠肝炎病毒、仙台病毒等感染後,血清中不產生抗體。因此,只能檢查同胎雜合仔鼠血清中的抗體情況,或直接分離病原體,或將裸鼠的肝組織接種於雜合仔鼠後,再用血清學方法測定其相應抗體。因此,對裸鼠一些致病性的病毒和台澤氏病原體等的檢查方法,主要是檢查同胎雜合鼠血清中抗體的產生情況,來判斷裸鼠是否被這些病原體所感染。

G. 生物安全實驗室的技術指標

2.1 生物安全實驗室一般實施兩級隔離。一級隔離通過生物安全櫃、負壓隔離器、正壓防護服、手套、眼罩等實現;二級隔離通過實驗室的建築、空調凈化和電氣控制系統來實現。二級~四級生物安全實驗室應實施兩級隔離。
2.2 生物安全主實驗室二級隔離的主要技術指標應符合表1.2的規定。本表中的雜訊不包括生物安全櫃、動物隔離器的雜訊,如果包括上述設備的雜訊,則最大不應超過68 dB(A)。
表1.2 主實驗室的主要技術指標 名稱 潔凈度級別 換氣次數(次/h) 與由室內向外方向上相鄰相通房間的壓差(Pa) 溫度
℃ 相對濕度% 雜訊dB(A) 最低
照度
lx 一級 / 可自然通風 / 16~28 ≤70 ≤60 300 二級 8~9 非實驗動物時
可回風≤50%
8~10 -5~-10 18~27 30~65 ≤60 300 三級 7-8 全新風:
10~15
主要保護環境:可回風≤30% -15~-25 20~26 30~60 ≤60 500 四級 7-8 全新風:
>10~15 -20~-30 20~25 30~60 ≤60 500 說明:1、表中/ 表示不作要求。
2、三級生物安全實驗室主實驗室相對於大氣的最小負壓不得小於-30Pa,四級生物安全實驗室主實驗室相對於大氣的最小負壓不得小於-50Pa。
3、對於飼養動物的三級生物安全實驗室主實驗室,其相對於大氣的最小負壓不得小於-50Pa;動物四級生物安全實驗室主實驗室相對於大氣的最小負壓不應小於-60Pa。
4、動物生物安全實驗室的參數應符合GB14925-2001《實驗動物 環境及設施》的有關要求。
與微生物危險度等級相對應的生物安全水平、操作和設備對照表: 危險度 生物安全水平 實驗室類型 實驗室操作 安全設施 1 級 基礎實驗室——一級生物安全水平 基礎的教學、研究 GMT 不需要;開放實驗台 2 級 基礎實驗室——二級生物安全水平 初級衛生服務;診斷、研究 GMT 加防護服、生物危害標志 開放實驗台,此外需BSC 用於防護可能生成的氣溶膠 3 級 防護實驗室——三級生物安全水平 特殊的診斷、研究 在二級生物安全防護水平上增加特殊防護服、進入制度、定向氣流 BSC 和/或其他所有實驗室工作所需要的基本設備 4 級 最高防護實驗室—— 四級生物安全研究水平 危險病原體研究 在三級生物安全防護水平上增加氣鎖入口、出口淋浴、污染物品的特殊處理 Ⅲ級 BSC 或Ⅱ級 BSC並穿著正壓服、雙開門高壓滅菌器(穿過牆體)、經過濾的空氣 注:BSC:生物安全櫃;GMT:微生物學操作技術規范

H. 生物類實訓室對於環境有哪些要求

生物類實訓室對於環境要求通風。

對於飼養動物的三級生物安全實驗室主實驗室,其相對於大氣的最小負壓不得小於-50Pa;動物四級生物安全實驗室主實驗室相對於大氣的最小負壓不應小於-60Pa。動物生物安全實驗室的參數應符合GB14925-2001《實驗動物 環境及設施》的有關要求。

不像其他種類的特殊實驗室,這類的實驗室並不一定需和大眾交通分隔出來,而在這類實驗室中僅需要再開放實驗台上依循微生物學操作技術規范(GMT)即可。在一般情況下,被污染的材料都留在開放廢棄物容器。

(8)動物隔離器如何運行擴展閱讀:

技術指標:

生物安全實驗室一般實施兩級隔離。一級隔離通過生物安全櫃、負壓隔離器、正壓防護服、手套、眼罩等實現;二級隔離通過實驗室的建築、空調凈化和電氣控制系統來實現。三級~四級生物安全實驗室應實施兩級隔離。

生物安全主實驗室二級隔離的主要技術指標應符合表1.2的規定。本表中的雜訊不包括生物安全櫃、動物隔離器的雜訊,如果包括上述設備的雜訊,則最大不應超過68 dB(A)。

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