‘壹’ 动物实验室需要具备的仪器有哪些
动物实验室主要是作什么检验用的,有哪些功能间,喜格实验室建设这里以兽医动物实验室举例:
(一)样品处理室
解剖台、离心机、混合研磨器、冰箱等。
本实验室主要用于动物尸体解剖,观察动物临床症状及表现,试验前样品处理及保存等工作。
(二)细菌分离培养室
超净工作台、恒温生化培养箱、显微镜、微波炉等。
本实验室主要用于细菌分离培养、药敏试验。
(三)常规血清学检测室
酶标仪、洗板机、恒温培养箱、微量移液器、微量震荡器、冰箱等。
本实验室主要用于常规血清学抗原(或抗体)检测、药物残留检测。
(四)分子生物学检测室
PCR仪及其配套设备、超净工作台、4℃高速离心机、水浴锅、冰柜、工作台、物品架等。
本实验室主要利用PCR技术检测细菌/病毒抗原。
(五)病理学检测室
石蜡切片机、冷冻切片机、荧光显微镜等。
本实验室主要用于制作病理组织切片(如石蜡切片、冰冻切片)检测细菌或病毒抗原、组织学病理变化。
‘贰’ 家兔空气栓塞实验
一、实验目的:
通过空气栓塞实验,了解栓子运行的途径、空气栓塞的部位及后果。
二、实验动物:
成年兔子一只。
三、实验用品:
5ml注射器、5号针头、手术剪、7号缝合丝线、四方盘、手术刀,止血钳、大烧杯。
四、实验步骤:
1、由兔耳缘静脉注入6ml空气。
2、注完空气,放开兔子,观察兔子症状。
3、家兔死亡后,立即打开胸腔(离胸骨左右缘1~2cm处切断肋骨),暴露心脏,心脏还在继续收缩,观察扩张的右心耳及肺动脉薄壁是否有空气泡。
4、再将同心脏走走出的大血管都结扎、并在远端剪断,然后将心肺一并取出,游离并结扎心脏,并放在水的玻璃器皿中,在水中将右心切开,此时观察是否有空气溢出水面出现气泡。
五、实验结果:
注射完空气后,兔子开始兴奋,烦躁,挣扎,抽搐,呼吸急促,过了31s后,兔子开始张口呼吸,呼吸逐渐变慢,58s后,兔子死亡。
在打开兔子胸腔后,观察到兔子心脏还在继续跳动,右心房内有泡沫状血液;在水中将右心房切开,观察到右心房有气泡逸出。
六、讨论:
注射的空气进入耳缘静脉以后,沿上腔静脉,迅速到达右心,由于心脏的收缩和舒张,从而将空气和血液搅拌成大量的泡沫血,当心肌收缩时可阻塞肺动脉出口导致猝死。
由于血液不能到达肺部进行气体交换,从而使机体缺氧,导致家兔活动增多,烦躁,呼吸加深加快予以代偿,由于是泡沫血,缺氧继续存在,导致家兔活动减弱,最终致死。
‘叁’ 动物学实验的实验常用试剂
【反应剂】
1、检验葡萄糖
配方一本尼迪克(Benedict)溶液
(1) 在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克无水碳酸钠。
(2) 在50毫升加热的蒸馏水中溶解8.5克硫酸铜。
把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用(存放时间较久而产生沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制)。
本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出0.15 ~0.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。
配方二裴林(Fehling)溶液
(1)把34.5克硫酸铜溶于500毫升蒸馏水中。
(2)把125克氢氧化钾(钠)和173克酒石酸钾钠溶解在500毫升蒸馏水中。
上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。
2、检查淀粉的试剂
鲁哥氏(Lugol's)溶液(碘液)
取6克碘化钾溶于20毫升蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸馏水,贮存在棕色试剂瓶内。
碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。
3、检查蛋白质的试剂
配方一 米伦(Millon)试剂
在60毫升浓硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加温可助溶),溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。
在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。
配方二 双缩尿试剂
分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液。
在3毫升待测物中加入1毫升10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。
4、检查脂肪的试剂
苏丹Ⅲ(Ⅳ)酒精饱和溶液
取0.2克苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ),放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。
5、酸碱指示剂
配方一酚酞试剂和试纸
酚酞试剂 取1克酚酞,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。
酚态试纸 取1克酚酞,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸馏水。把绿纸条放入酚酞溶液中浸湿后,取出,放在无氨气影响处晾干。
酚泰试剂(试纸) pH值变色范围8.2~10,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。
配方二红蓝石蕊试纸
取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中搅拌,使它溶解,然后过滤。把滤液分成两份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出现红色为止。另1份滴入稀氢氧化钠溶液,到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条,随后取出滤纸条,放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干,即的红、蓝两种石蕊试纸。
红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。
6、检查二氧化碳的试剂
检查二氧化碳的试剂,可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。
配方一 溴代麝香草酚蓝溶液
取0.1克溴代麝香草酚蓝,溶解在100毫升蒸馏水里,滴入少量0.1%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。
溴代麝香草酚蓝溶液pH值变色范围是6.0(黄)~7.6(蓝)。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。
配方二石灰水
在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙),变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。
如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。
7、检查细胞生活力的试剂
检查细胞有无生活力,可用中性红甲基蓝试剂。配制的方法是先分别配制1%中性红溶液和1%甲基蓝溶液,这两种溶液各取1份混合,用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色。