动物细胞破碎要多久

1. 我想知道细胞破碎的方法及各种方法的原理和优缺点

机械法：主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法，常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。

常用的细胞破碎方法有反复冻融法、超声破碎法、酶处理法、自溶法和表面活性剂处理法 。

细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤，破碎方法的得当与否，直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。实验室对组织细胞的破碎方法很多，有机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法等。

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细胞破碎条件

在破碎前，材料常需要预处理，如动物材料要除去与实验无关甚至有妨碍的结缔组织，脂肪组织和血污等，植物种子需要除壳，微生物材料需将菌体和发酵液成分分开等。

对同一实验材料，由于实验要求不同，采用的破碎方式也存在一定差异，如提取中的核酸和提取其中的核苷酸，前者必须保持十分温和的条件，以保持分子的完整性;后者可采用强烈手段。

不同实验规模、不同实验材料和实验要求，使用的破碎方法和条件也不同。一些坚韧组织，如肌肉、植物的根茎等，常需要强烈的搅拌或研磨作用，才能把其组织细胞破坏。而比较柔软的组织如肝、脑等，用普通的玻璃匀浆器即可达到完全破坏细胞的目的。

2. 动物细胞的破碎方法难度大于植物细胞吗

动物细胞的破碎方法比植物细胞难度小，植物细胞有细胞壁，比动物细胞难破碎。

3. 产生细胞膜悬液,细胞破碎技术有哪些总结原理和优缺点。

液体剪切压力
原理：通过将样品从高压腔转入到低压腔时产生的快速压力落差来破碎细胞。
优点：破碎快速有效，适合大体积细胞破碎。
缺点：可导致样品温度升高（操作时需要冷却系统）

超声
原理：通过高频率的声波破碎细胞。
优点：操作简单。
缺点：可导致样品温度升高，其很难通过冷却系统降温，剪切力有可能导致蛋白质受损，噪音较大，破碎量较小。

玻璃珠磨碎
原理：用玻璃珠的搅动来磨碎细胞。
优点：对于很难破碎的细胞（如酵母）非常有用。
缺点：有些慢且有噪音。

渗透压
原理：从高渗透压转向低渗透压介质。
优点：操作简便，花费低廉。
缺点：仅用于外壁较脆弱的细胞（如动物细胞）。

反复冻融
原理：通过反复形成冰晶破碎细胞；通常结合酶法裂解下细胞。
优点：操作简便，花费低廉，产生大量细胞膜碎片。
缺点：慢，也许会损伤敏感蛋白质或者破坏蛋白质和细胞膜的相互作用，产量低。

酶法裂解
原理：常和其他技术一同使用，如反复冻融或渗透压破碎法；溶菌酶是破碎细菌细胞壁最常用的酶。
优点：温和，可产生较大的细胞膜碎片。
缺点：慢，产量低。

4. 冻融法细胞破碎一次需要多长时间

1、高速组织捣碎 ：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种 子等。2、玻璃匀浆器匀浆 ：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。3、超声波处理法 ：用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法多适用于微生物材料，用大肠杆菌制备各种酶，常选用50-100毫克菌体/毫升浓度，在 1KG至10KG频率下处理10-15分钟，此法的缺点是在处理过程会产生大量的热，应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。4、反复冻融法： 将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。5、化学处理法： 有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏，细菌细胞壁较厚，可采用溶菌酶处理效果更好。无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸 （DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺酰氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酥活 力，但不是全部，还可通过选择pH、温度或离子强度等，使这些条件都要适合于目的物质的提取。

5. 细胞破碎的最简单方法是

是动物细胞么，在做细胞膜的提取实验的时候，把成熟的红细胞直接放清水里面，它就会吸水胀破的嘛。

6. 体外培养的动物细胞，用超声波破碎，用于测定一些酶的活力，想问问大家设置的功率及破碎时间、循环次数

有点高，功率大的时候，蛋白质容易降解。10cycles有点少吧，我们破大肠杆菌都是用10s/10s，10min的

7. 细胞破碎的方法有哪些

（1）酸碱处理：调节pH值，改变蛋白质的荷电性质，提高产物的溶解度。 （2）化学试剂处理：用表面活性剂或有机溶剂（甲苯）处理细胞，增大细胞壁的通透性，降低胞内产物的相互作用，使之容易释放。 （3）酶溶：利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞，使细胞壁受到部分或完全破坏后，再利用渗透压冲击等方法破坏细胞膜，进一步增大胞内产物的通透性。 酶溶的优点：操作温和，选择性强，酶能快速地破坏细胞壁，而不影响细胞内含物的质量，但缺点是酶的费用高，因而限制了它在大规模生产中的应用。 化学渗透法与机械破碎法相比：速度低，效率差，且化学或生化试剂的添加形成新的污染，给进一步的分离纯化增添麻烦。但化学渗透法选择性高，胞内产物的总释放率低，可有效抑制核酸的释放，料液粘度小，有利于后处理。

8. 细胞破碎的方法及特点

那要看是什么细胞了，如动物细胞，就可以先用液氮急冻后在研钵中研碎，之后放到离心管里冰浴超声波粉碎，植物细胞我们没做过

9. 动物细胞和植物细胞在水中哪个先破裂

动物细胞，因为植物细胞有坚韧的细胞壁支撑，即使吸水，也不会很容易破裂