如何做好动物实验

A. 影响动物实验效果的动物实验技术因素有哪些

一、动物选择
选择好适合研究需要的实验动物是获得正确实验结果和实验成功的重要环节。应按照不同实验的要求选择合适的动物。如作肿瘤的研究工作，就必须了解哪种动物是高癌种，哪种是低癌种，各种动物自发性肿瘤的发生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠，C3H/He系经产雌鼠有80～100%的自发性乳腺癌。AKR系8～9月龄小鼠有80～90%自发性血病。C57BL系、津白Ⅰ等小鼠是低癌品系小鼠。不同动物对同一因素的反应虽然往往是相似的，但也常常会遇到动物出现特殊反应的情况。如5岁以上的雌狗常自发性乳腺肿瘤，如果给雌狗孕激素，就更容易诱发乳腺肿瘤。雌激素还容易引起狗发生贫血，这在其它实验动物是很少见的。怎样选择好实验动物可参看实验动物的选择和应用一讲。

二、实验季节
生物体的许多功能随着季节产生规律性的变动。目前已有大量资料表明，动物对化学物作用的反应也受到季节的影响。例如在春、夏、秋、冬分别给10只大鼠注入一定量的巴比妥纳，发现入睡时间以春季最短。秋季最长，而睡眠时间则相反，春季最长，秋季最短（见表11-19）。

表11-19大鼠对巴比妥纳反应的季节变动

季节 入睡时间（分） 睡眠时间（分）
春 56.1±11.0 470±34.0
夏 93.5±11.3 242±14.3
秋 120.0±19.0 190±18.7
冬 66.5±8.2 360±33.0
不同实验季节，动物的机体反应性有一定改变。如不同季节对辐射效应有影响。家兔的放射敏感性在春夏两季升高，秋冬两季降低。在狗的实验中，在春、夏两季照射后的死亡率比秋、冬为高。小鼠的放射敏感性，在冬季和补夏显着升高，而初夏和夏季则降低。大鼠的放射敏感性则没有明显的季节性波动。因此，这种季节的波动在进行跨季度的慢性实验时必须注意的。

三、昼夜过程
机体的有些功能还有昼夜规律性变动。例如有人给小鼠皮下重复注入40%的四氯化碳溶液0.2ml后，在同一天不同的时间将动物处死，观察肝细胞的有丝分裂动态，以了解肝细胞变性的修复情况。结果列于表11-20。资料表明，小鼠肝细胞有丝裂的昼夜变动十分明显。

表11-20小鼠肝细胞有丝分裂系数（‰）的昼夜变动

分组 昼夜的钟点
0 2 4 6 7 8 9 10
实验组 2.4±1.2 2.6±1.2 1.02±0.17 4.11±0.27 0.26±0.06 1.36±0.25 0.66±0.25 0.57±0.08
对照组 2.8±1.86 2.6±0.16 0.2±0 6.3±1.48 0.46±0.07 0.26±0.07 0.97±0.05 0.66±0.04
动物对照射的敏感性在昼夜间有不同的变化，这种变化见于不同性别、种系和年龄的小鼠和大鼠。白天放射敏感性降低（死亡较少，LD50/30较高，体重下降较少，肝脏损伤较轻）夜间升高。同时，在小鼠和大鼠实验中，除了夜间（21～24点）的高峰外，还发现白天（小鼠9～12点，大鼠15点）损伤加重情况。下午和后半夜射敏感性最低。大鼠与小鼠不同，其放射敏感性虽有昼夜间的明显波动，但不很剧烈。经实验证明实验动物的体温、血糖、基础代谢率、内分泌激素的分泌均发生昼夜节律性变化。因此这类实验的观察必须设有相应的对照，并注意实验中某种处理的时间顺序结果的影响。为了得到可比性的实验结果，所有实验组动物应在同一时间内进行照射或其它实验处理。

四、麻醉浓度
动物实验中往往需要将动物麻醉后才能进行各种手术和实验。要求麻醉浓度要适度，而且在整个实验过程中要保持始终恒定。因此不能不分别实验要求和动物品种（或品系）而用同一种麻醉剂，也不能乱用麻醉剂。因为不同的麻醉剂有不同的药理作用和副作用，应根据实验要求与动物种类而加以选择，使用合适。麻醉浓度的控制是顺利完成实验获得正确实验结果的保证。如果麻醉过深，动物处于浓度抑制，甚至濒死状态，动物各种正常反应受到抑制，那是不会做出可靠的实验结果的。麻醉过浅，在动物身上进行手术或实验，将会引起强烈的疼痛刺激，使动物全身，特别是呼吸，循环功能发生改变，消化功能也会发生改变，如疼痛刺激会反射性的长时间中止胰腺的分泌。所以麻醉浓度必须合适。由此也不难理解在整个实验中保持麻醉浓度的始终一致是如何必要了，因为麻醉浓度的变动，会使实验结果产生前后不一致的变化，给实验结果带来了难以分析的误差。

五、手术技巧
动物实验中除了要注意选择合适的实验动物，用的试剂要纯粹，仪器要灵敏，方法要准确外，还必须注意手术技巧，即操作技术的熟练。手术熟练可以减少对动物的刺激，动物受的创伤、

B. 在做动物实验时,怎么做才能使动物不至于那么痛苦的死去

实施实验动物安乐死的方法

动物实验结束后为了减轻动物的疼痛及痛苦此时从人道主义的观点出发可以对这些动物实施安乐死实施安乐死时有一些特殊的要求需要考虑最重要的是安乐死的方法必须人道动物实验中有时为了获得动物组织器官进行研究。安乐死的方法应该对动物的组织器官的研究没有影响。另外实施安乐死的方法还要可靠有效经济容易实施对实验人员必须安全。

常用的实施安乐死的方法为药物化学法

是指用一种药物或其他化合物处死动物。最常用的是使用过量的全身麻醉剂。使动物心跳停止。呼吸衰竭而死亡。戊巴比妥相对来说作用迅速给药简单价格低廉。是常用的实施安乐死选择的药物腹腔或静脉注射过量的戊巴比妥（100～150mg／kg)即可巴比妥酸盐可致血管扩张。引起器官淤血，可能影响组织学研究。用于安乐死的吸入麻醉剂有乙醚氟烷恩氟烷和异氟烷等。

CO2也常被用做安乐死的吸入剂。将动物放置含有100％CO2的环境中很多种动物就产生严重的呼吸困难而死亡。用这种方法处死动物时动物意识清醒能感受到痛苦不是理想的方法。

如果将动物放置在一定湿度C02和O2的比例为6：4的混合气体环境中等动物逐渐丧失意识后将CO2浓度升至100％。在最少保持10min以确定动物死亡这时动物完全是在无意识状态下死亡的死亡需30～60min。如果时间太长则不是首选的方法。CO2等吸入剂能诱发动物肺水肿可能影响其后研究中对动物组织器官的利用。

C. 动物实验过程中应注意的问题有哪些方面，越详细越好，先谢了！

1、动物来源（最重要）。
1》健康
2》品种纯
3》最好用途专一
2、双盲实验
3、饲养条件，饲养条件对实验结果影响极大。

祝楼主实验顺利！

D. 如何做好实验动物与动物实验中生物危害的防护工作

各级生物安全实验室防护的实验对象和防护措施简单介绍如下：
(一)一级生物安全防护(BSL-1)适用实验对象和防护措施
已知对健康成年人无致病作用，对实验室工作人员和环境的潜在危害很小。防护措施：工作人员进入实验室应穿工作服，实验操作时应戴手套，必要时佩戴防护眼镜。离开实验室时工作服必须脱下并留在实验区内。不得穿着进入办公区等清洁区域。用过的工作服应定期消毒。

(二)二级生物安全防护(BSL-2)适用实验对象和防护措施
实验对象：对人体和环境有中等危害或具有潜在危险的致病因子。防护措施：除符合BSL-l的要求外，还应该符合下列要求：进入实验室时，应在工作服外加罩衫或穿防护服，戴帽子、口罩。一次性手套不得清洗和再次使用。当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，应使用面部保护装置(如：护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。

(三)三级生物安全防护(BSL-3)适用实验对象和防护措施
实验对象：是通过呼吸途径使人感染导致严重的甚至是致死性疾病的感染性材料。防护措施：除符合BSL-2的要求外还应该符合下列要求：①工作人员在进入实验室时必须使用个体防护装备，包括两层防护服、两层手套、生物安全专业防护口罩(不应使用医用外科口罩等)，必要时佩戴眼罩、呼吸保护装置等。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。②在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。实验室区域内应配备应急药品。

(四)四级生物安全防护(BSL-4)适用实验对象和防护措施
实验对象：是危险的和新的感染性材料，表现出通过气溶胶途径传播实验室感染和致命疾病的高度危险性。防护措施：除符合BSL-3的要求外，还应该符合下列要求：所有工作人员进入BSL-4实验室时要更换全套服装。工作后脱下所有防护服，淋浴后再离去。在BSL-4实验室中工作人员需穿着整体的由生命维持系统供气的正压工作服或使用Ⅲ及生物安全柜操作病原。

E. 有请动物实验高手~~~~

必须在腹股沟吗？我们的大小鼠静脉注射都采用尾静脉。至于确定是否重复注射，比如麻醉剂一般是根据体重折算好量后，注射计算量的80%-90%，然后等待一两分钟看反应，麻了就不用补了，不然就再打到计算量，再等待。
腹股沟么，没经验，背位绑定后绞了毛，用指甲轻轻弹弹让血管凸出来会比较好注射吧？这些小动物小角度进针后很容易判断是否在血管里的，然后再慢慢推药。我们打兔子是这么打的……对不起！我真的没打过腹股沟……

以下来自
http://www.bioon.com/experiment/General1/86203.shtml

1. 将小鼠固定好,将尾巴拉直，绷紧，这是成功的第一步。

小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。

或者用这个方法：1 小鼠要固定好，自制一个笼子，前面通气，中间最好有一个挡板，让小鼠不能后退，筒子后面开一个口，尾巴从这里出来，这样固定牢靠；2、注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟，有利于注射；3、先远后尽，不要一开始就从尾根部，那样失败了不好办；4、进血管后注意保持稳定，针尖很容易刺穿血管的。至于能否穿进，个人手感如何，全靠自己啦。多练习，一定很快掌握的，不难，绝对不难！我练习10余只小鼠就比较熟练了

2. 用酒精棉球擦拭尾巴,使血管扩张;或者用热水或者热毛巾焐热，使静脉扩张；选用适当的针头，越细越好；在尾部较靠近上段的地方注射，这里血管比较大。用酒精或热水擦拭，擦拭的时候，可把尾巴用力扯在桌面上。注射状态为尾巴发白，紧靠白色的尾骨两侧清晰可见两根红色静脉。
3.用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定,; 手法：握住1ml注射器前面0.1ml处。右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指处 按此手形进针；看针尖前面那个斜面有3/4（关键），如果血管充盈则进1/2，进入，停，上挑针头，进针；左右轻摆动，如可动，可注射。
原则是：把你第一次打进的手形，完全固定下来，每次都重复。
4.注射:注射时左手扯尾，使尾巴紧贴桌面，尾巴与桌边紧贴转弯处为进针部位，一般选择距尾尖1/4或1/3处进针，此处皮肤较薄，血管清晰，进针容易。进针时针头与桌面平行，针尖稍稍朝下，从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针，一旦进入，须将针头稍稍上挑进入，针头沿血管进入，肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进，可明显地感觉到针行通畅，毫无阻力。若针头不在血管中，手感针行有阻力，有一种堵的感觉。进针时不要太深，针头入皮肤后马上把针头略往上，平行进针，针扎入时有落空感，推液时无阻力则说明成功了！如针头处出现皮丘则说明在皮下，推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处，甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来，不要马上在最高处打，因为你们要打这么多天。要为以后作准备。用热水、酒精、红外都可以扩张血管。可以视情况而用。总而言之，最重要的是“熟能生巧”。你最好先练习一下或请高手相助。不然到了最后几天，真的很难打的。

2。注射：针进入后，切记手不可发抖，因为血管壁非常薄，容易扎穿。推药时，要缓推。若进针成功，推药顺畅，无阻力；若推药时感觉有阻力，说明针头不在血管中，须及时拔出，重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾静脉注射并不难，主要是一种感觉。若用上十只鼠练手，你必会找到感觉。心要静，手要稳，要有耐心。我研一的时候尾静脉注射让我头疼万分，越急越打不进去。后来静下心来，边注射边找感觉，很快就熟练了。
祝你找到感觉

5.通过看有无回血来测试针是否在静脉内;

6.注射.
做到以上步骤,保证注射成功!

注：（1）如果做细胞移植时，应该尽量把细胞打散，不然很容易引起栓塞！

（2）练习：建议你先用蓝墨水练手，因为新手往往看不出打入的是皮下还是静脉
其实真的只能熟能生巧一般推荐在尾下1/3处进针，但是我觉得1/2处准确度较好，个人经验针头可以插深入些，防止意外摆动戳破静脉而注入皮下，很多时候你觉得进了血管打的却是皮下，就是因为这个原因。

或者用：经常尾经脉注射胎盘兰，比较容易，静脉在侧面比较粗的那个，可以做个容器，我们是用一个50ml的离心管前面弄个开口，后面的螺盖弄个洞，把老鼠装进去，比较容易，把都对准管小鼠自动进去，把尾巴从盖子的洞穿出来，操作极为方便。刮毛，用热水烫一下，血管涨起来就可以，具体的感觉还要自己实践一下掌握，不过还容易，有3－4只就可以掌握。

（3）规律：动物越小越好操作，小鼠比大鼠容易，幼年大鼠比成年大鼠容易；对于小鼠最好还是尾静脉注射，这样损伤最小；成年大鼠实在不行可以选股静脉注射，相对要容易一些；最重要的一点，必须多练，进针时的那种感觉必须自己好好体会，熟能生巧，这是常识。

F. 动物实验是如何进行的

虽然，很多人都受惠于动物实验的结果，但是对动物实验是如何开展的并不十分了解。本文介绍常规的实验动物实验的开展情况，提供相关的科普知识的同时，也对即将在GIBH开展动物实验的人员以指导。 一、实验可能参与的人员动物实验做为生物医学研究的一个重要部分，它涉及到许多领域。通常一个实验需要来自不同专业背景的人员，可能包括兽医、医生、病理学家、计算机科学家、工程师、动物保健技术人员、科研技术人员、以及不同领域科学家。团队的大小取决于研究需要。通常一个团队包括首席研究员，联合协调员，研究技术人员，实验动物兽医，实验动物技术员，还包括商业动物供应商和设备制造商以及机构的实验动物管理委员会（IACUC）。首席研究员（PI）作为主要研究者是计划和协调所有阶段的研究工作的科学家。提供研究思路，投资实验和解释数据并负责发表研究结果报告。实验动物兽医从事动物保健活动，制订各种规章制度，包括对内、对外的管理制度和各项标准操作程序（SOP）；并确保实验遵守各种法规和政策和动物福利保障。联合协调员和研究技术员负责联合调查和研究履行协议所需的具体的研究任务。协调研究小组与动物实验中心的一些事务，包括动物实验申请、动物申购、动物实验操作等。动物技术人员执行许多动物保健工作，是维护健康的动物的关键。他们可以控制产生不利影响的实验数据，如：清洁时间表，卫生程序，饲料和垫料，湿度，热，光，或噪音的差异，控制不良因素的干扰。他们在兽医指导下确保动物得到适当的医疗照顾。机构实验动物管理委员会（IACUC）负责监督动物研究计划。IACUCs审查研究协议，要求使用的动物，以确保动物护理和使用的方法适当，并在遵守法规和制度的政策或既定的作业程序。他们每年两次对动物设施进行检查和评估机构内的动物保健计划，并报告他们的发现和改正不足之处，以制订的正式计划。在体制层面，IACUC和动物实验中心负责人需要对有特殊需求的实验进行论证可行性，并施加必要的控制，以确保优质动物保健和实验的安全性和科学性。 二、研究计划一项研究计划，在开始之前，科学家必须写一个详细的拟进行动物实验的研究大纲。这份文件，被称为动物实验方案。

G. 请问做动物实验前，都需做那些准备工作啊感谢！

设计实验方案，要详细一些，如果是解剖，要先了解实验动物的基本构造，下刀的位置等。可以准备实验用的白大褂以防心爱的衣服被弄脏，怕脏的话可以准备手套。如果只是观察草履虫什么的，可以不用。实验画图很重要，笔纸橡皮什么的事先也要准备好。做解剖似乎还要做点心理准备，微微有点血腥。其实最重要的还是了解实验要做什么，怎么做，同时注意卫生安全。

H. 如何做好动物实验

方法/步骤
实验标题：阐述本实验的核心.
实验时间：主要是实验开始和结束的时间,一般在实验设计的时候已经拟好.
实验编号：这是进行系统管理和实验记录检索的一个非常有效的方法.不过可以用实验时间代替,也可以用实验标题代替.
实验目的：主要阐述此实验的目标结果.
实验材料：按照材料或试剂名称,公司,规格,货品编号将实验中用到的每一个器材和试剂均注明.
实验步骤：分时间段和实验先后步骤详细阐述实验中的每一步,越详细越好.
7
实验结果：原始记录实验中产生的所有数据和图像.
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结果分析：对实验结果进行分析阐述,对本次实验做总结.
END
注意事项
实验数据不可人为随意更改.
结果讨论应该客观,并且依据实验结果,做到有理有据.
应该一边做实验一边记录实验步骤和数据,不可后续之后再凭借记忆进行更改.容易出现错误.