如何判断动物细胞培养的洗液

A. 动物细胞培养 早期胚胎培养 的培养液相同吗. 两酸两盐两素一血清。

不同！
一般动物细胞培养使用的培养基为基础培养基（含有无机盐离子、谷氨酰胺、丙酮酸钠、抗生素等）和血清。
而早期胚胎的培养液需要维持胚胎干细胞的多能性不能使用血清（因为血清会诱导其分化），而使用血清替代物，在基础培养基基础上还需要加入一些生长因子如FGF维持。

希望能帮到你！

B. 动物细胞培养基的成分有哪些

动物细胞培养基有平衡盐溶液、天然培养基、合成培养基、无血清培养液等四种。

平衡盐溶液：

目前常用的平衡盐溶液有乳酸钠和复方氯化钠溶液（1.86%乳酸钠溶液和复方氯化钠溶液之比为1:2）与碳酸氢钠和等渗盐水溶液（1.25%碳酸氢钠溶液和等渗盐水之比为1:2）两种。

天然培养基：

天然培养基也称复合培养基，是含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物。

天然培养基主要取自动物体液或从动物组织分离提取。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，缺点是成分复杂，来源受限。

合成培养基：

合成培养基（synthetic medium），又称为组合培养基，是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的，其所含的成分（包括微量元素在内）以及他们的量都是确切可知的。合成培养基一般用于实验室中进行的营养、代谢、遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的研究。

无血清培养液：

无血清培养液是不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分（如生长因子、组织提取物等）的细胞培养液。

无血清培养液由基础培养液和附加成分组成，取代血清的补充物：

1、激素和生长因子；

2、结合蛋白类；

3、低分子量营养因子；

4、贴壁和铺展因子等。

C. 动物细胞培养的基本过程

一、准备工作

准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。

二、取材

在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器皿中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。

理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。

取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。

三、培养

将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。

正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。

细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。

四、冻存及复苏

为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度—－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。

在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。

(3)如何判断动物细胞培养的洗液扩展阅读：

进入细胞间开始细胞培养时，注意事项：

①确定所有的细胞操作用的溶液和耗材都已经消毒并检测没有问题，不确定的溶液和耗材请勿使用，除非特殊情况，不要借用别人的溶液。

②确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。

③确定酒精灯内的酒精量，需要的话及时进行补充。

④确定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖，实验开始前可以把所有瓶盖旋松。

⑤尽量不要直接倾倒溶液，除非瓶口没有被烧坏。如果倾倒失败，溶液粘在瓶口，请用喷过75%酒精的纸巾仔细清洁瓶口周围（不要接触到瓶口）后在火焰上简单烧灼。

⑥操作时如果不能肯定所用的耗材是洁净的，必须及时更换。

⑦实验完毕及时收拾，保持工作区域清洁整齐，最后用75%酒精清洁台面。

D. 动物细胞培养的注意事项

原代动物细胞培养：
1、实验材料要新鲜，从活体分离材料后要低温保存，并尽快进行细胞分离实验。
2、无菌操作。操作时用的培养液，可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。
3、用酶法分离细胞时，注意酶液的浓度和控制消化时间。
贴块法分离细胞时，注意动作要轻柔，不要伤到细胞组织，组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。
4、培养液的选择。不同的细胞有对培养液中营养的要求不同，根据所分离细胞的特性选择。

传代细胞培养：
1、无菌操作
2、控制消化时间
3、及时关注细胞生长状态

E. 比较动物细胞培养液和植物细胞的培养基有什么区别

植物细胞培养要加无机物,有机物.特别注意生长素和细胞分裂素,在不同时期加的量不同.
动物细胞培养要加糖,氨基酸,无机盐等等.由于还有一些营养物质未搞清楚,所以还要加血清,血浆等天然成分.

F. 动物细胞培养的一般步骤是什么

一、复苏
1.把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2.把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。
3.把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。
4.标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。
5.3天换一次培养基。
二、传代
1.培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2.把原有培养基吸掉。
3.加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。
4.细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5.用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。
6.把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。
7.倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。
8.根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。
三、 冻存
把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制： 70%的完全培养基 20񳀐%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。

要注意的就是无菌操作！

G. 动物细胞培养液的主要成份与植物组织培养培养基的成份有什么不同

植物组织培养基的成分主要是水，蔗糖，矿质营养-无机盐，植物激素和琼脂等。。。通常属于固态培养基。动物细胞培养液是液态培养基，主要成分是水，糖类-葡萄糖，无机盐，生长因子和动物血清等。动物血清可以提供现在还不知道的必不可少的营养物质。。。另外它们的无机盐的成分浓度等不一样。。。

H. 如何确认所配制的动物细胞培养基没有被污染

将未接种的培养基在适宜的温度下，放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生即可。

动物细胞培养需要提供无菌、无毒环境，因此，除了要对培养液和培养用具进行灭菌外，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。

(8)如何判断动物细胞培养的洗液扩展阅读

动物细胞培养的条件

（1）无菌、无毒的环境：

①消毒、灭菌；

②添加一定量的抗生素；

③定期更换培养液，以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．

（3）温度和PH。

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的二氧化碳（维持培养液的PH）。

I. 动物细胞培养液和发育培养液的区别

专一性不同,导致其营养成分不同.胚胎培养液比较全面,它需要提供胚胎生长和发育所需的所有营养成分,二细胞培养液只需提供细胞其能生长分裂的营养就足够了.

J. 动物细胞培养怎样检测有毒物质的,原理是什么

如果你的意思是利用动物细胞培养来检测某物质对细胞的毒性如何，即将该物质加入该细胞的培养基当中，浓度高低不同做成一系列梯度（将加了该化学物质的细胞与未加的细胞进行对照比较如果该化学物质不易溶解于该细胞的培养基，则需要多做一个对照组，为加了该物质的溶剂但未加该物质的细胞比较的时候主要看存活率和代谢率两个指标。